四、基因工程工具酶.ppt

基因工程的工具酶（instrumental enzyme of gene engineering）是应用于基因工程各种酶的总称，包括核酸序列分析、标记探针制备、载体构建、目的基因制取、重组体DNA制备等所需要的酶类。 核酸酶：能够将聚核苷酸链的磷酸二酯键切断的酶，属于水解酶。 核酸酶的分类： 1）根据核酸底物分RNA酶（Rnase）、DNA酶（Dnase）和底物非专一性核酸酶； 2）根据作用方式分内切核酸酶（endonuclease）和外切核酸酶（exonuclease）； 3) 根据对底物碱基专一性分碱基专一性核酸酶（切割部位的碱基序列高度专一性）和非碱基专一性核酸酶（切割部位的碱基序列随机性） 在限制修饰系统中，限制作用是指一定类型的细菌可以通过限制性核酸内切酶的作用，破坏入侵的外源DNA(如噬菌体DNA等)，使得外源DNA对生物细胞的入侵受到限制； 而生物细胞(如宿主)自身DNA分子通过甲基化酶的作用，在碱基特定位置上发生了甲基化，可免遭自身限制性内切酶的破坏。 限制－修饰作用实际就是细菌中的限制性内切酶降解外源DNA ，维护自身遗传稳定的保护机制。  用于核酸操作的工具酶 回文结构（palindrome）：序列正读和反读是一样的，即有一个中心对称轴，从这个轴朝两个方向读序列是完全一样的。 在切割