【全程方略】高中生物 专题5课题1 DNA的粗提取与鉴定精讲导学课件 新人教版选修1.pptVIP

(3)实验中六次搅拌的目的: 目　　的 第一次 搅拌加蒸馏水的鸡血细胞液,加速细胞破裂 第二次 搅拌含DNA的高浓度盐溶液,加速DNA的溶解 第三次 搅拌加蒸馏水的NaCl溶液,均匀稀释以析出更多DNA 第四次 搅拌含DNA的高浓度盐溶液,加速DNA的溶解 第五次 搅拌含DNA的酒精溶液,提取含杂质较少的DNA 第六次 搅拌含DNA白色丝状物的盐溶液,加速DNA的溶解 * 【易错提醒】(1)若选取肝脏细胞或植物细胞,不能直接用蒸馏水和甲苯处理,由于肝组织含较多蛋白质纤维,植物组织有胞间连丝和细胞壁,应先充分研磨。 (2)过滤含DNA的黏稠物时不能用滤纸代替纱布,否则会因DNA被吸附到滤纸上,而导致DNA大量损失。 * 【典例训练2】(2013·江苏高考)某同学用洋葱进行DNA粗提取和鉴定实验,操作错误的是(　 ) A.加入洗涤剂后用力进行快速、充分的研磨 B.用蛋白酶纯化过滤后的研磨液中的DNA C.加入酒精后用玻璃棒轻缓搅拌 D.加二苯胺试剂摇匀后沸水浴加热 * 【解题关键】解答本题，需要注意以下两点： (1)明确洗涤剂的作用是使细胞破碎。 (2)明确鉴定DNA和鉴定染色体(质)的染色剂不同，鉴定DNA用二苯胺试剂，鉴定染色体(质)用龙胆紫溶液或醋酸洋红液。 * 【解析】选A。本题考查DNA的粗提取和鉴定实验。A项中，应该是加入洗涤剂和食盐后进行轻缓、充分的搅拌和研磨，故错误。B项中，加入蛋白酶，消除滤液中的蛋白质，用于纯化DNA，故正确。C项中，DNA不溶于酒精溶液，加入酒精后用玻璃棒轻缓搅拌获取的丝状物就是DNA，故正确。D项中，二苯胺试剂用于鉴定DNA，其鉴定过程需要沸水浴加热，故正确。 * 【规律方法】DNA的粗提取实验过程中两次析出DNA的不同点： (1)原理不同：第一次析出DNA是利用DNA在0.14 mol/L 的NaCl溶液中溶解度最低的原理，第二次是为了获得较纯净的DNA，利用的是DNA在冷却的体积分数为95%的酒精中能沉淀析出的原理。 (2)纯度不同：第二次析出DNA是在第一次析出的基础上，又进行溶解和再次析出，因此第二次析出的DNA中去掉了更多的杂质，纯度更高。 * 专题5　DNA和蛋白质技术 课题1　DNA的粗提取与鉴定 * * 一、提取DNA的方法和原理 1.思路与方法: (1)思路:选用一定的___________方法分离具有不同_______ _________的生物大分子。 (2)方法:利用DNA与__________________等在物理和化学性质 方面的差异,提取DNA,去除其他成分。 物理或化学 物理或 化学性质 RNA、蛋白质和脂质 * 2.原理: (1)分离原理:DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的_____溶液 中溶解度不同,利用这一特点,选择适当的_______就能使____ 充分溶解,而使_____沉淀,或者相反,以达到分离的目的。 NaCl 盐浓度 DNA 杂质 * (2)提纯原理: ①DNA不溶于_____溶液,但是细胞中的某些蛋白质则可溶于其 中。 ②_______能水解蛋白质,但对DNA没有影响。 ③大多数蛋白质不能忍受60℃～80℃的高温而发生变性,而DNA 在_____以上才会变性。 ④_______能够瓦解细胞膜,但对DNA没有影响。 酒精 蛋白酶 80℃ 洗涤剂 * (3)鉴定: DNA+_______ 蓝色 二苯胺 沸水浴 _______ * 二、DNA粗提取与DNA鉴定的实验设计 1.提取材料的选取及原则: (1)选用________相对较高的生物组织。 (2)细胞较容易破碎,其中的____容易提取。 DNA含量 DNA * 2.破碎细胞,获取含DNA的滤液: (1)动物细胞的破碎: ①选材及方法:选用动物细胞作为实验材料时,由于其无 _______,因此可直接采用吸水涨破的方法。 ②过程:以鸡血为例 在鸡血细胞液中加入一定量的_______,同时用_______搅拌,细 胞会吸水涨破,然后用_____过滤,过滤后收集滤液即可。 细胞壁 蒸馏水 玻璃棒 纱布 * (2)植物细胞的破碎: ①方法:需要先用_______溶解细胞膜。 ②过程:以提取洋葱的DNA为例 在切碎的洋葱中加入一定的_____________,进行充分地搅拌和 _____,过滤后收集研磨液。 洗涤剂 洗涤剂和食盐 研磨 * 3.去除滤液中的杂质: 方案一:利用DNA在不同浓度的NaCl溶液中_____________,通过 控制NaCl溶液的浓度去除杂质。 方案二:直接在滤液中加入_______,反应10 min～15 min,嫩肉 粉中的___________能够分解蛋白质。 方案三:将滤液放在___________的恒温水浴箱中保温10 min～ 15 min,注意