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微生物的概念和特点 微生物（Microorganism）是指一群肉眼看不到的，形体微小，结构简单，必须借助光学或电子显微镜才能看清其外形的一类微小生物的统称。 ①体积小，比表面积大（说明微生物有巨大的营养物质吸收面、代谢的排泄面和环境信息的交换面） ②吸收多，转化快 ③生长旺，繁殖快 ④种类多，分布广 ⑤适应强，变异快 巴斯德的贡献 ①彻底否定了自然发生说（曲颈瓶实验） ②证实了发酵是由微生物引起的 ③创立了巴氏消毒法 ④预防接种提高机体的免疫功能 科赫的贡献 ①证实病原菌和疾病的关系，提出了柯赫法则（科赫法则的内容，证明某种微生物是否为某种疾病病原体的基本原则，首先在患病肌体里存在着一种特定的病原菌，并可以从该肌体里分离得到纯培养；然后用得到的纯培养接种敏感动物，表现出特有的形状；最后从被感染的敏感动物中又一次获得与原病原菌相同的纯培养。） a 病原微生物必须来自患病机体 b 从患者身上必须分离到该病原体，并且可以培养出来 c 人工接种这种病原微生物，必须引发相同的疾病 ②对病原细菌的研究作出了突出的贡献： a 证实了炭疽杆菌（Bacillus anthracis）是炭疽病的病原菌； b 发现了肺结核病的病原菌结核分枝杆菌；1905年获诺贝尔奖 C 发现了引起霍乱的霍乱弧菌 ③建立了分离纯化微生物的实验技术 a. 固体培养基分离纯化微生物的技术 b. 配制培养基 4、革兰氏阳性细菌的细胞壁特点：厚度大（20—80nm） 化学组分简单，只含90%肽聚糖和10%磷壁酸（磷壁酸是革兰氏阳性菌的特有成分） 革兰氏阴性细菌的细胞壁比革兰氏阳性菌细胞壁薄，而结构较复杂，分外膜和肽聚糖层。在细胞壁和细胞质膜之间有一个明显的空间，称为壁膜间隙。 细菌的特殊构造 （1）鞭毛： 鞭毛是从细胞质膜和细胞壁伸出细胞外面的蛋白质组成的丝状体结构，使细菌具有运动性。 鞭毛纤细而具 有韧性，直径仅20nm，长度达15~20 ?m，可以分为三部分：基体（base body）、钩形鞘（hook）和鞭毛丝（helical filament）。 具鞭毛的细菌，鞭毛数目和在细胞表面分布因种不同而有差异，是细菌鉴定的依据之一。 鞭毛有三类：单生鞭毛、丛生鞭毛和周生鞭毛。 （2）菌毛：细菌细胞表面发现的象头发样的特殊的蛋白质表膜附属物，有几微米长。 （3）性菌毛：与遗传物质从一个细菌转移到另一个细菌有关，即在细菌接合生殖时起作用。性菌毛比菌毛稍长，数量少，只有一根或几根。 （4）芽孢：某些细菌在生长发育后期，在其细胞内形成的一个壁厚、含水量低、抗逆性强的休眠体。也称为内生孢子。 它们是由细菌的DNA和外部多层蛋白质及肽聚糖包围而构成，芽孢对干燥、热、辐射具有高度抗性。 芽孢的结构：芽孢结构相当复杂，最里面为核心，含核质、核糖体和一些酶类，由核心壁所包围；核心外面为皮层，由肽聚糖组成；皮层外面是由蛋白质所组成的芽孢外壁；最外面是芽孢衣。 核心 —— 皮层 —— 芽孢外壁 —— 芽孢衣 1）芽孢杆菌属和梭菌属产生一种特化的结构它无繁殖功能，为抗逆性休眠体。 2）在光学显微镜下用特殊的芽孢染色(如孔雀绿染色)或通过相差显微镜能够观察到芽孢。 3）由于芽孢有许多层包围细菌遗传物质的结构，使得芽孢具有惊人的、对所有类型环境应力的抗性，例如热、紫外线辐射、化学消毒剂和干燥 大荚膜：厚度≥0.2 μm 荚膜：与细胞壁结合牢固。{微荚膜：厚度0.2μm （5）糖被{粘液层：疏松粘附于细胞表面，边界不明显且易被洗脱的称为粘液层 功能：1）对细菌表面起渗透屏障作用； 2）保护细胞免受吞噬； 3）保护细胞免受干燥损伤； 4）帮助细菌附着到物体表面。 （6）质粒： 某些细菌还含有独立于染色体外的小分子环状DNA称作质粒。 其上携带的基因对细菌正常生活并非必需，但在某些情况下对细胞有利，如抗生素抗性质粒。 质粒常以不同大小的环状双螺旋存在，可以独立复制，也可整合到染色体上 6、革兰氏染色法 初染（结晶紫1min，阳性紫色，阴性紫色） 媒染（碘液1min，阳性仍为紫色，阴性仍为紫色） 脱色（95%乙醇30s，阳性保持紫色，阴性脱去紫色） 复染（番红或复红30s，阳性仍显紫色，阴性红色） 原理：细菌的不同显色反应是由于细胞壁对乙醇的通透性和抗脱色能力的差异，主要是由肽聚糖层厚度和结构决定的。经结晶紫染色的细胞用碘液处理后形成不溶性复合物，乙醇能使它溶解，所以染色的前两步结果是一样的，但在革兰氏阳性菌细胞中，乙醇能使厚的肽聚糖层脱水，导致空隙变小，由于结晶紫和碘的复