非小细胞肺癌基因检测__培训课件.pptVIP

DNA ARMS反应 实时定量 PCR ARMS法操作流程及数据解读 数据分析 内参信号 (HEX) 突变信号: + - 内参信号: + + 标本 ＃1 （突变阳性） 标本 ＃2 （突变阴性） 突变信号 (FAM) 组织标本 内参信号 (HEX) 测序法与ARMS法比较 测序法 ARMS 敏感度 20-30% 1% FFPE标本成功率 低 高 检测流程 复杂慢长 简单快速 数据分析要求 高 低 假阳性机会(交叉污染) 多 少 假阴性机会 多 少 仪器成本 高 低 商用试剂盒 无 有 试剂成本 低 略高 小结： 了解你的标本 --新鲜/冰冻组织FFPE组织 --手术标本小活检标本 选择合适的方法 --ARMS是目前较敏感快速方法，且容易开展 --测序是传统的方法，但敏感度有限，过程复杂，不易普及 做好组织标本及DNA质控是关键 非肿瘤组织标本的有效利用 --在无肿瘤组织情况下，外周血cfDNA、胸水及细针穿刺等细胞学标本均可用于检测EGFR突变，但其确切的敏感度与特异性尚需进一步探索 --必须选择足够敏感的方法 EGFR激酶抑制剂的耐药性 作为临床上的最大问