miRNA的研究进展.doc

miRNA在病毒感染诱发的免疫反应研究进展 摘要： miRNA的发现给生物医药领域的研究带来了巨大的价值。miRNA通过结合mRNA引起基因转录后沉默，达到调控基因表达的目的。研究病毒感染细胞的miRNA表达谱是否可作为一种新的策略治疗病毒感染导致的疾病，本文就RNA病毒与miRNA、miRNA与RNA病毒的复制、病毒与细胞miRNA这三个方面的研究进展进行综述。 关键词：miRNA, 病毒RNA，细胞miRNA，病毒miRNA miRNA的简介 成熟miRNA是一条长约18-24nt的单链RNA，并由前体miRNA加工而成。miRNA具有亚型，A.thaliana miRNA有稳定的miRNA亚型，比其本身多1-2个核苷酸。miRNA亚型与miRNA共表达，常常显示为差异argonaute 复合物联系。这些亚型是由父母剪接体miRNA的差异剪切形成的[4]。 miRNA首先在RNA聚合酶II的作用下转录出前体miRNA，再经过Dicer加工，形成22nt的成熟miRNA。成熟的miRNA将与RNA沉默复合体(RISC）相结合。其中，RISC是由miRNA和mRNA靶点、Argonaute蛋白家族成员和辅助因子组成[1]。其作用机理是miRNA与靶mRNA 3’-UTR内的靶序列互补配对，调节靶基因的表达[2]。并且，一般不完全的互补配对导致靶基因的翻译受到抑制。miRNA介导的翻译抑制或mRNA降解有可能在一种P小体中进行[3]。 真核生物基因组转录的98%是非编码RNA，占这么大比例的非编码RNA参与基因表达调控（101）。 miRNA参与多个生物过程，包括，转录、染色体结构、RNA形成和修饰、mRNA稳定性和翻译、以及蛋白稳定性和转运（12.，30,34）。 RNA病毒可以产生miRNA miRNA是由22个碱基组成的非编码RNA。其最主要的生物功能就是引起转录后基因沉默和调控基因表达。目前，已有上百种保守细胞和病毒衍生的miRNA被识别和分离，发现miRNA对细胞转录组和病毒生命循环都具有调节作用。且发现在病毒衍生的miRNA探测中目前仅局限于DNA病毒的研究，造成一个RNA病毒不可能利用miRNA参与转录调控的假象。因此，将RNA病毒不产生miRNA这一现象归因于在复制上的限制，复制限制是随着基因组发夹的RNaseIII的过程而发生。3经过修饰的传染病毒A可以表达细胞水平的microRNA-124，microRNA发夹插入核外输出蛋白的内含子中，microRNA转录导致内源基因加工和功能miRNA-124的产生。这一研究表明，RNA病毒基因组整合一个发夹，不会使基因片段不稳定，也不改变miRNA介导的基因组靶位。因而，RNA病毒能够产生miRNA，并对病毒复制没有负面影响。 3 RNA病毒在宿主细胞中的复制 已有大量文献报道，病毒感染会显著影响细胞水平的miRNA表达，RNA病毒可与细胞miRNA直接互作或间接影响细胞miRNA的表达，从而达到放大RNA病毒复制的潜能。 已有研究显示病毒svRNA参与基因的复制，并可作为发现新药的靶标(文献)。1.svRNA通过与病毒多聚酶装置的互作影响流行病毒A从转录到复制的转换。敲除svRNA对mRNA和cRNA有轻微的影响。但是，会导致vRNA以片段特异性的方式急剧丢失，影响病毒基因组的保守性复制[1]。许多研究表明流行病毒A中svRNA的生物合成和分子特征的像细胞，可以利用RNA进行核酸与蛋白质水平的联系，诸如剪接，端粒保持，翻译。 svRNA的合成，RdRp具有切断vRNA片段和从RNA合成svRNA的功能。产生svRNA的快速方法是切断svRNA，但是svRNA的切断会破坏基因组模板，对病毒的生命循环是致命的。替代方法是cRNA合成svRNA，并且cRNA以独立于svRNA的方式产生。病毒从转录到复制的转换，关键在于cRNA的稳定性，这个结果可以由阻断svRNA主要导致vRNA的选择性丢失支持[27]。svRNA独立于cRNA的合成，也可由NP功能的研究支持，NP积聚与病毒从转录到复制转换有关，NP暂时阻断panhandle的二级结构，完整的cRNA才得以合成[48]。NEP/NS2[38]和结合svRNA的RdRp组成RdRp复制酶，转录酶是缺乏svRNA。 svRNA具有8种不同RdRp复制酶，并以片段特异的方式调控vRNA。在复制酶结构中，RdRp与svRNA的物理联系促使以片段特异性方式指导反式启动子的继续，并一直延伸到基因组的末端。相反，在病毒mRNA的合成中，由于RdRp顺式结合于vRNA模板的5末端，转录酶中也不存在svRNA促使5端形成polyA尾巴结构。 4．病毒感染后细胞miRNA的表达谱变化 病毒感染后细胞miRNA表达