第七章 生物技术要点.ppt

转基因猪 器官移植：无人类病原污染，无需辨别血性；猪的器官在大小、结构和功能上与人体器官相近 缺点：排异反应 克隆简史： 1938年科学家提出动物克隆 1962年克隆出一只蝌蚪 1984年用胚胎细胞克隆出一只羊 1996年克隆羊“多利”出生 2000年猴子克隆成功 2001年有人开展克隆人研究 克隆技术发展大事记 1995 年用一只母羊的胚胎细胞克隆两头绵羊（苏格兰） 1996 年人类历史上首次克隆哺乳动物“多莉” （苏格兰） 1997 年克隆带有一个人类基因的绵羊“波莉” （苏格兰） 1998 年克隆3代50只实验鼠（美夏威夷） 1999 年克隆3头山羊，使它们的乳液中含有一种对心脏病具有疗效作用的蛋白质（美马萨诸塞洲） 2000 年用早期胚胎细胞克隆恒河猴（美俄勒冈洲） 2001 年11月首次克隆早期阶段的人类胚胎（美马萨诸塞洲） 2002年4月6日安提诺里宣称对5000对夫妇的克隆计划已有一妇女怀孕8周（意大利） 2002年12月26日布瓦瑟利耶宣布第一名克隆女婴降生（法国） 2003年2月14日克隆羊“多利”被执行安乐死（英国 ）。 动物克隆的意义及弊端1、动物克隆的意义 证明已分化的细胞具有全能性 挽救濒临灭绝的物种 培育人造器官 复制有重要经济价值的动物 建立人体疾病的动物模型 为不育患者带来福音 2、动物克隆技术用于克隆人的危害 克隆动物流产率高、早衰、生理异常表明生殖克隆本身存在很大缺陷 打破人类的生态平衡、性别平衡 影响物种的进化 潜在的后果是可能出现“胚胎农场”、“定制婴儿”、“卵子商品” 克隆后代极易患上相同的疾病 克隆人对生命伦理的最大挑战是人的地位与尊严 各国纷纷反对克隆人 德国1991年就颁布了《胚胎保护法》，严禁人类胚胎干细胞及克隆胚胎干细胞的研究 日本通过了禁止克隆人、允许人类胚胎干细胞的相关研究 美国众议院已经通过禁止克隆人法案 英国批准允许使用人类胚胎进行研究，最多从14天的胚胎中提取细胞。 俄罗斯、澳大利亚等国胚胎干细胞研究也得到了相应的限制。 中国支持可能改善人类健康、治疗疾病的干细胞研究，坚决反对克隆人，即生殖性克隆。 2003年3月2日联合国一个关于禁止生殖性克隆人的国际公约特委会会议为期1周，各国纷纷表示不给克隆人发准生证 * * * * * * * * * * * * * Traditional Diagnostics 先对病原物质进行培养，培养后再分析它的生理学特性 确定是那种病原物 现代分子诊断就是利用分子生物学和分子遗传学的技术，从DNA/RNA水平检测、分析基因的存在和结构、变异和表达状态，从而对疾病作出诊断的方法。 Molecular Diagnostics 检测寄生虫感染方法的比较 方法 优点 缺点 显微镜镜检 简单易行，可直接观察到寄生虫的形态 速度慢，灵敏度低，对经验水平要求高费时费工，无法判断形态相近的寄生虫 体外培养、接种 能检测到活的寄生虫，并可检测感染性和感染烈度 速度慢，花费高，寄生虫可能难以进行体外培养，且必须使用动物材料 抗体检测 简单、快速、能够实现自动化，可用于检测大量的样品 无法区分活的寄生虫与处在潜伏状态的寄生虫，有时会有非特异反应发生 DNA杂交及PCR 快速灵敏，能够实现自动化，可分辨不同种的寄生虫，不需要从前有寄生虫感染病史 花费高、步骤多，无法区分活的和死的寄生虫，有时会有假阳性或假阴性 ELISA － Enzyme-linked immunosorbant assay 原理：利用一抗与目标分子的特异性结合 检测步骤：将待测样品结合在固体支持物上→加入Primary antibody →加入Secondary antibody →加入无色的底物 缺点：同一抗体混合物中不同抗体的含量会有差异，而且每次制备的抗体的量之间也会有差异；无法区分相类似的目标分子 最好采用Monoclonal antibody DNA Hybridiaztion DNA Hybridiaztion 将单链目的DNA结合于膜上 加入单链、标记过的探针DNA，在一定的温度条件和离子浓度下使探针分子与目标DNA碱基配对 冲洗，洗去多余的未结合的标记探针DNA 检测探针和目标DNA形成的杂合分子 DNA labeling (1) Radioactive labeling (32P，33P, 35S, 14C, 3H) X-ray film Sensitive, Short-lived (2) Non radioactive labeling (Biotin-avidin or Streptavidin, Chemiluminescent light etc) Stable Same se