医学SCI论文范文云南昭通天麻三种变型中四个成分的含量比较研究.docVIP

云南昭通天麻三种变型中四个成分的含量比较研究 　　摘要：目的 比较云南昭通乌、绿、黄天麻中天麻素、腺苷、对羟基苯甲醇和对羟基苯甲醛的含量。方法 采用AgilentTC-C18色谱柱（4.6mm×250mm，5μm），以甲醇-0.1%醋酸水 溶液为流动相，梯度洗脱，流速1.0mL/min，检测波长270nm，柱温35 ℃。结果 四个成分的含量比较，天麻素：黄乌绿；腺苷：绿乌黄；对羟基苯甲醇：绿黄乌；对羟基苯甲醛：黄 乌绿。结论 乌、绿、黄天麻中四个成分的含量有明显差异，天麻素和对羟基苯甲醛的含量以黄天麻最高，腺苷和对羟基苯甲醇的含量以绿天麻最高。 　　关键词：天麻；天麻素；腺苷；对羟基苯甲醇；对羟基苯甲醛 　　中图分类号：R284.1 文献标志码：A 文章编号：1007-2349（2014）07-0062-03 　　天麻（Gastrodia elata Bl.）是我国的名贵中药，临床多用于头痛眩晕、肢体麻木、小儿惊风、癫痫、抽搐、破伤风等症。作为道地药材的云南昭通天麻有乌天麻（Gastrodia elata Bl.f.glauca）、黄天麻（Gastrodia elata Bl.f.flavida）和绿天麻（Gastrodia elata Bl.f.viridis）三种变型。天麻主要含有酚类、有机酸类、含氮类、甾醇及多糖类化合物，其中天麻素、对羟基苯甲醇、对羟基苯甲醛和腺苷等化合物 认为是天麻的主要活性成分。但是《中国药典》2010年版（一部）天麻含量测定项下，仅对天麻素做了相关规定[1]，为更加客观、全面的评价云南昭通天麻 质量，对其进行质量控制，本研究建立了4个成分同时测定的HPLC方法，并对乌、绿、黄三种天麻变型进行了含量分析和比较。 　　1仪器与供试药 　　安捷伦高效液相色谱仪，二级管阵列检测器。天麻素、腺苷、对羟基苯甲醇和对羟基苯甲醛对照品（中国药品生物制品检定所提供），乌天麻、黄天麻、绿天麻干品，均购于昭通天麻研究所，经昭通天麻研究所陈顺芳老师鉴定。甲醇为色谱纯，醋酸为国产分析纯。 　　2 方法与结果 　　2.1 色谱条件及系统适应性试验 色谱柱：Agilent TC-C18柱（4.6 mm×250 mm，5 μm）；流动相A-甲醇，B-0.1%醋酸水溶液；线性梯度洗脱程序：0～30 min，5% A；30～35 min，20% A；35～55 min，25% A；流速：1.0 mL·min-1；检测波长：270 nm；柱温35℃；进样量20 μL。 　　在上述色谱条件下，天麻素、腺苷、对羟基苯甲醇和对羟基苯甲醛主色谱峰与相邻其它色谱峰的分离度大于1.5，理论塔板数不低于5000。对照品和三种天麻样品色谱。 　　1.天麻素；2.腺苷；3.对羟基苯甲醇；4.对羟基苯甲醛 　　2.2 对照品溶液的制备 分别精密称取对照品天麻素、腺苷、对羟基苯甲醇和对羟基苯甲醛适量，置同一25 mL量瓶中，加10%甲醇适量使溶解并稀释至刻度，摇匀，得质量浓度分别为383，12.4，49.0，5.6 mg·L-1的混合对照品溶液。 　　2.3 供试品溶液的制备 取本品药材粉末（过40目筛）约0.5 g，精密称定，置圆底烧瓶中，精密加入蒸馏水20 mL，称重，加热回流提取1 h，放冷再称重，用蒸馏水补足减失的质量，离心。精密量取上清液5 mL于烧杯中，加入甲醇约20 mL，振摇3 min至白色絮状沉淀产生完全，离心。上清液浓缩至近干，残渣加10%甲醇溶解，转移至5 mL容量瓶中，并用10%甲醇稀释至刻度，摇匀，经0.45 μm微孔滤膜滤过，取续滤液，即得。 　　2.4 线性关系考察 分别精密量取混合对照品溶液0.5，1.0，2.5，4.0，5.0，10.0 mL置10 mL量瓶中，加10%甲醇稀 释至刻度，摇匀，即得不同浓度的系列混合对照品溶液。在上述色谱条件下进行分析，以峰面积Y对浓度X（mg·L-1）绘制标准曲线，得天麻素、腺苷、对羟 基苯甲醇和对羟基苯甲醛的回归方程和相应的R2值分别为：y=14.792x-10.203，R2=0.998；y=1.017x- 0.2569，R2=0.9975；y=4.2738x-1.0872，R2=0.9975；y=0.395x-0.1814，R2=0.9965。 　　结果表明天麻素、 腺苷、 对羟基苯甲醇和对羟基苯甲醛分的线性关系良好。 　　2.5 精密度试验 取同一混合对照品溶液，在上述色谱条件下连续进样6次，记录各自峰面积，计算天麻素、腺苷、对羟基苯甲醇和对羟基苯甲醛峰面积的RSD分别为1.4、1.1、1.4、1.1%。 　　2.6 重复性试验 精密称取天麻（乌天麻）粉末0.5 g，按2.3项下方法平行制备6份供试品溶液，在上述色谱条件下进行分析，计算含量。天麻素、腺苷