2010-第12章蛋白质生物合成幻灯片.pptVIP

The wonderful world 第12章 Protein Biosynthesis (Translation) 内 容 一、蛋白质生物合成体系 蛋白质合成中的三种RNA 内 容 一、蛋白质生物合成体系 内 容 一、蛋白质生物合成体系 原核生物 起始(initiation) 延长(elongation) 终止(termination ) mRNA起始AUG上游有富嘌呤序列 核糖体循环过程动画 蛋白质合成过程动画 真核生物翻译起始复合物 内 容 一、蛋白质生物合成体系 翻译后修饰(posttranslational modification)。 一级结构修饰、空间结构修饰、折叠为天然构象等。 蛋白质的靶向输送(protein targeting)。 一、折叠为天然构象 一级结构决定空间构象 新生肽链N-端一出现，折叠即开始。 大多数蛋白质折叠需要其他酶和蛋白质辅助。 入 核 分泌到胞外 内 容 一、蛋白质生物合成体系 影响翻译起始的抗生素 影响翻译延长的抗生素 嘌呤霉素作用示意图 二、其他干扰蛋白质生物合成的物质 使eEF-2发生ADP糖基化共价修饰 2．蓖麻蛋白(ricin) A链作用于真核核蛋白体大亚基的28S rRNA，使28S rRNA降解，大亚基失活 3. 干扰素(interferon, IFN) 真核细胞被病毒感染后分泌的具有抗病毒作用的蛋白质，可抑制病毒的繁殖。 分为α-型、β-型和γ-型 干扰素的作用机制: 二、氨基酸的活化 三、合成过程 四、翻译后修饰和靶向输送 五、干扰与抑制 (1) 热休克蛋白(heat shock protein, HSP) 促进多肽折叠为天然构象。 热休克蛋白包括HSP70（DnaK)、HSP40(DnaJ)和GrpE三族。 1. 分子伴侣:识别非天然构象、促进正确折叠 大肠杆菌中的HSP70 反应循环 (2) 伴侣蛋白(chaperonin) 为非自发性折叠蛋白质 提供能折叠形成天然构象的微环境。 当待折叠肽链进入Gro EL的桶状空腔后，Gro ES可作为“盖子”瞬时封闭Gro EL空腔出口。封闭后的桶状空腔提供了能完成该肽链折叠的微环境。 Gro EL-Gro ES复合物 Gro EL-Gro ES反应循环 2. 蛋白质二硫键异构酶 催化错配二硫键断裂，形成正确二硫键连接 二、蛋白质一级结构修饰 （一）肽链末端的修饰 （二）个别氨基酸的共价修饰 1．糖基化 2．羟基化 3．甲基化 4．磷酸化 5．二硫键形成 6．亲脂性修饰 ------Gingras et al, 1999 例：鸦片促黑皮质素原(POMC)的水解修饰 （三）多肽链的水解修饰 三、空间结构的修饰 （一）亚基聚合 （二）结合辅基 （一）靶向输送的蛋白质N-端存在信号序列(signal sequence) 四、靶向输送至细胞特定部位 核定位信号含4～8个氨基酸短序列，富含碱性氨基酸。进核定位后，NLS不被切除。 入核的蛋白质 信号序列----进入内质网 输送至溶酶体 输送至线粒体 二、氨基酸的活化 三、合成过程 四、翻译后修饰和靶向输送 五、干扰与抑制 干扰进位的抗生素 引起读码错误的抗生素 影响肽键形成的抗生素 影响转位的抗生素 一、许多抗生素(antibiotics)通过抑制蛋白质生物合成发挥作用 抗菌药 抑制EF-G、阻止转位 EF-G 夫西地酸、细球菌素 抗菌药 阻止转位 原核核蛋白体小亚基 壮观霉素 医学研究 抑制转肽酶、阻断肽链延长 真核核蛋白体大亚基 放线菌酮 抗肿瘤药 使肽酰基转移到它的氨基上后脱落 原核、真核核蛋白体 嘌呤霉素 抗菌药 抑制转肽酶、阻断肽链延长 原核核蛋白体大亚基 氯霉素、林可霉素、红霉素 抗菌药 改变构象引起读码错误、抑制起始 原核核蛋白体小亚基 链霉素、新霉素、巴龙霉素 抗菌药 抑制氨基酰-tRNA与小亚基结合 原核核蛋白体小亚基 四环素、土霉素 抗肿瘤药 阻碍翻译起始复合物的形成 原核、真核核蛋白体小亚基 伊短菌素 应用 作用原理 作用位点 抗生素 常用抗生素抑制蛋白质生物合成的原理与应用 四环素族 氯霉素 链霉素和卡那霉素 嘌呤霉素 放线菌酮 白喉毒素 + + 延长因子-2 （有活性） 延长因子-2 （无活性） 1．白喉毒素(diphtheria toxin) 二、氨基酸的活化 三、合成过程 四、翻译后修饰和靶向输送 五、干扰与抑制 氨基酸 + tRNA 氨基酰- tRNA ATP AMP＋PPi 氨基酰-tRNA合成酶 总反应 氨基酰-tRNA合成酶对底物氨基酸和