呋塞米对大鼠的利尿作用(实验报告).docVIP

呋塞米对大鼠的利尿作用 目的：利尿药是一种直接作用于肾脏，增加电解质和水的排出从而使尿量增加的药。其中呋塞米是这种药代表，也是一种强效的利尿药。在学习了利尿药的利尿机制之后，以本实验来验证性的观察呋塞米对麻醉大鼠以及清醒大鼠的利尿作用，从而加深对利尿药及其机制的理解，并掌握麻醉和清醒动物的利尿方法。 原理：呋塞米是一种高效的利尿药，其作用机制为：与肾小管髓袢升支粗短上皮上的Na+——K+——2Cl-同向转运体选择性的结合，从而抑制了其转运能力，因此，Na和Cl在肾小管处的重吸收就受到抑制，因此尿浓缩功能受到影响，从而排出大量几乎等渗的尿液。 同时，预先用1%NaCl对实验大鼠进行水负荷可以使实验现象更加明显。对清醒大鼠的利尿实验应采取代谢笼法。 一 呋塞米对麻醉小鼠的利尿作用 1 材料与方法 1.1 实验动物：雄性大鼠 1.2 实验药品：乌拉坦麻醉药，1%呋塞米，生理盐水 1.3 实验器材：手术剪，止血钳，眼科剪，烧杯，刻度试管，导尿管，丝线，缝针，试验台，灌胃针。 2 实验方法： 取一只正常大白鼠，称重，然后用生理盐水按照20ml/kg的比例进行灌胃处理。 腹腔注射乌拉坦1.2g/kg进行麻醉。麻醉好后将大鼠固定在大白鼠台上，取仰卧位，然后从颈部作一纵切口，分离出一侧颈外静脉，并做好静脉插管。 做腹部切口，暴露膀胱，并以荷包蛋缝合的方式对膀胱进行插管，并排空膀胱。 于颈静脉插管处注射生理盐水1ml/kg，并收集20分钟尿液流出量作为正常值。 同样方法注射呋塞米1ml/kg，并收集20分钟尿液。比较尿量的变化。 3 实验结果：如下。 分别注射生理盐水和呋塞米20分钟收集到的尿量 组号 生理盐水 呋塞米 1 0.45 2.5 2 0 1 3 0 0.28 4 0 2.1 5 1 3 均数 0.29 1.776 标准差 0.442 1.114 p值 0.0151 4 结果分析： 从上表可以看出，每组实验注射生理盐水后收集的尿量明显比注射呋塞米后的小，说明了呋塞米确有利尿作用。 每组所得实验结果偏差较大，以致标准差很大。这与实验动物的生理状态，实验操作过程有关，是由于个体原因造成的。 可以看到，p＜0.05，这说明统计结果具有统计意义，即呋塞米具有高效的利尿作用。 5 注意事项 分离颈总静脉和插管时，应尽量小心，不可大力撕扯，因为经脉璧薄易被撕裂或者误伤。 膀胱插管不宜过深。在做腹部手术时应注意不可损伤输尿管。 所有插管内的空气均应排干净。 二 呋塞米对清醒大鼠的利尿作用 1 材料与方法 1.1 实验动物：大白鼠 1.2 实验药品：1%呋塞米，生理盐水。 1.3 实验器材：称，注射器，灌胃针，烧杯，代谢笼。 2 实验方法： 每组取大鼠2只（大小尽量相同），称重，并给大鼠灌胃，灌胃比列为：生理盐水30ml/kg。 将两只大鼠分开，其中一只放入代谢笼内做对照组。另一只肌内注射呋塞米：1ml/kg。放入另一代谢笼。 观察。没30分钟收集尿液一次，连续观察90分钟。 3 实验结果：如下表。 组号 30min对照组 30min试验组 60min对照 60min实验组 1 0 6.4 0 9.8 2 0 4.9 0 7.3 3 2.5 7.5 3 11.4 4 0 3.2 2 4.8 均数 0.625 5.5 1.25 8.325 标准差 1.25 1.867 1.5 2.893 p值 0.005 0.005 4 结果讨论： 每组注射呋塞米的大鼠尿量明显多于注射生理盐水的大鼠，说明呋塞米能使大鼠尿量增多，即具有利尿效果。 由表可知，30分钟和60分钟均可得p＜0.01，即所得结果具有高度统计学意义，说明了呋塞米具有显著的利尿作用。 各组实验数据差异与大鼠个体差异和操作人员的操作以及实验时间等因素的不同有关，但是不影实验的整体结果。 5 注意事项： 在对对照大鼠处理时，可以肌内注射生理盐水：1ml/kg，以保证两只老鼠所受刺激等因素的影响一致。并且在实验过程中，应尽量保证两只老鼠所处环境相同，避免影响实验结果。 三 总结 在实验过程中，第二个实验比较简单，都能很好的得出结果，只是对灌胃技术掌握的不是很好，缺少练习，导致灌胃困难。 第一个实验相对困难，两处手术对大鼠造成了很大伤害，在做插管时，主要是对颈静脉插管不熟悉，以及初次接触荷包缝合方式故使实验时间延长。 这两个实验一起做，但没有证明呋塞米对清醒和麻醉大鼠的利尿作用有什么不同之处。可以另作研究。 固定大鼠时用力过大，麻醉药物使用过多，麻醉药浓度过高，静脉推注呋塞米过快，实验时间过长等原因均可造成实验大鼠死亡而使实验失败。为了保证实验成功，应尽量避免以上现象出现。 实验需要所有实验成员密切配合才能快速而成功的完成实验。 呋塞