实验三革兰氏染色课件.pptVIP

* * 微生物学实验 生命科学实验教学中心510室 实验三 革兰氏染色 实验目的 2. 掌握细菌涂片和革兰氏染色基本程序。 1. 理解革兰氏染色的原理。 革兰氏细菌的细胞壁结构 实验原理 ?革兰氏阳性细菌的细胞壁主要是由肽聚糖形成的网状结构组成的。 ?在染色过程中，当用乙醇处理时，肽聚糖脱水而孔障缩小，通 透性降低，使结晶紫-碘复合物被保留在细胞内而不易脱色， 因此，呈现蓝紫色，用G+表示。 实验原理 ?革兰氏阴性细菌的细胞壁中肽聚糖含量低，而易被乙醇溶 解的类脂质含量高。 ?当用乙醇处理时，类脂质溶解，细胞壁的通透性增加，使 结晶紫-碘复合物易被乙醇抽出而脱色，然后又被染上了复 　染液的颜色，因此呈现红色，用G-表示。 实验器材 （一）金黄色葡萄球菌,大肠杆菌,土壤分离细菌。 （二）革兰氏染色液：（结晶紫染液；Lugol碘液；95%乙 醇；稀释石炭酸复红染液），载玻片，酒精灯，接 种环，吸水纸，香柏油，擦镜纸等。 （三）光学显微镜。 实验步骤 一、细菌涂片的制作 取干净载玻片一块，在载玻片的左、右各加一滴单蒸水， 　按无菌操作法取菌涂片，做成浓菌液。 2. 再取干净载玻片一块将刚制成的浓菌液挑2-3环涂在玻片 两边制成薄的涂面，注意取菌不要太多。 3. 将玻片反复在酒精灯上方通过几次（用手指触摸涂片反