实验三细菌的革兰氏染色-Gramstain幻灯片.pptVIP

实验三 细菌的革兰氏染色 （Gram stain） 一、目的要求 了解革兰氏染色的原理； 学习并掌握革兰氏染色的方法。 二、基本原理 革兰氏染色反应是细菌分类和鉴定的重要性状。 它是1884年由丹麦医师Gram创立的。 革兰氏染色法（Gram stain）不仅能观察到细菌的形态而且还可将所有细菌区分为两大类：染色反应呈蓝紫色的称为革兰氏阳性细菌，用G+表示；染色反应呈红色（复染颜色）的称为革兰氏阴性细菌，用G-表示。 细菌对于革兰氏染色的不同反应，是由于它们细胞壁的成分和结构不同而造成的。 革兰氏染色需用四种不同的溶液：碱性染料（basic dye）初染液；媒染剂（mordant）；脱色剂（decolorising agent）和复染液（counterstain）。 碱性染料初染液——结晶紫（crystal violet） 媒染剂——碘（iodine） 脱色剂——95％的酒精（ethanol） 复染液——番红 三、实验器材 大肠杆菌，枯草芽孢杆菌、未知菌； 草酸铵结晶紫，番水水溶液，碘液，95%乙醇，载玻片，显微镜等。 四、实验步骤 1．涂片：将培养24小时的大肠杆菌和未知菌，培养12-18小时的枯草芽孢杆球菌、分别作涂片（注意涂片切不可过于浓厚），干燥、固定。固定时通过火焰1～2次即可，不可过热，以载玻片不烫手为宜。 2．染色 （1）初染：加草酸铵结晶紫一滴，约一分钟