临床生化检验方法学评价试验.pptVIP

计算 1. 检验20次测定数据中的离群值 如存在异常值时应剔除。对小样本测定来讲，可采用Grubbs检验，该方法是最合理的检验方法。 计算 用Grubbs检验准则，检验离群值的统计学公式是： 三、干扰试验 实验原理 干扰试验是测定特异性和干扰两者引起的误差。干扰物浓度一定时，产生的误差是恒定系统误差，误差的实际大小随干扰物的浓度而异。 三、干扰试验 实验原理 选用尿酸作GOD-POD法测定血糖的干扰试验，尿酸可疑和GOD反应生成的H2O2发生反应，使部分H2O2不能参与第二步POD的耦联反应，从而降低显色强度，产生负的测定误差。 尿酸对该反应有干扰，但不是尿酸被测定。 干扰试验既用于检测某方法的特异性，也用于检测干扰物质对方法的干扰作用，以评价分析方法的准确性。 试剂与器材 1. 血清标本 收集血糖浓度为6.7mmol/L的混合血清（要求同回收试验）。 2. 9.0mmol/L尿酸标准液。 3. GOD-POD试剂盒。 操作步骤 1. 样品制备 基础样品：血清0.9ml+蒸馏水0.1ml 干扰样品Ⅰ：血清0.9ml+9.0mmol/L尿酸标准液 0.05ml+蒸馏水0.05ml 干扰样品Ⅱ：血清0.9ml+9.0mmol/L尿酸标准液0.1ml 尿酸样品：蒸馏水0.9ml+9.0mmol/L尿酸标准液0.1ml 2.GOD-POD法测定各样品血糖。 计算 1.干扰物加入值计算 2.干扰值计算 3.干扰率计算 注意事项 1. 可疑干扰物浓度 加入可疑干扰物的浓度应明显高于通常所见浓度的上限，最好达到病理标本的最高值，尿酸升高的变动范围在0.42mmol/L~0.9mmol/L之间。 2. 干扰物对测定的影响与被分析物浓度无关，而与干扰物本身的浓度有关，所以产生的误差是恒定系统误差。 3. 其他注意事项与回收试验相同。 评价 偏差Bias允许误差（EA）的临界值，表明由于干扰物引起的偏差对临床诊断和治疗不产生不良影响，是可以被接受的。 血2.8mmol/、6.7 mmol/和8.9mmol/L时的EA为0.56mmol/L。 四、方法比较试验 实验原理 用两种方法同时检测一批样本，计算出两种方法间测定结果的差异，用以估计试验方法在检测样本时可能引入的误差。当选择准确度已知的常规方法作为比较方法时，部分误差来自比较方法，其他部分误差则来自试验方法。若选择准确度高的参考方法作为比较方法，可把方法间的任何分析误差都归于试验方法。 本实验以HK法测定血糖的参考方法作对比来评价GOD-POD法测定血糖的总系统误差。 试剂与器材 1. GOD-POD法试剂盒 2. HK法试剂试剂盒 3. 血清标本40份 （其浓度尽可能覆盖线性范围）。 操作步骤 1. 取40份血清标本，每份标本用GOD-POD和HK两种方法，分别作双份测定。 2. 每次（天）测定8个标本，双份测定时第一次按顺序1，2…….7，8，第二8，7…….2，1，共测试5次（天）。并计算两法各自的测定结果。 计算 1. 将实验结果作散点图，图中以x轴代表比较方法的测定值，y轴代表实验方法的测定值，在坐标纸上作图应散布于整个测定范围之内。 通过散点图可以观察到，测定数据的分布趋势，若所有测定值在坐标图中大致呈45°角的直线分布，提示被实验方法与比较方法的测定结果之间存在密切的相关关系；若呈明显的曲线分布，虽然在统计学上可按照非线性资料处理，但在这种情况下，实验方法被采用的可能性极小。 计算 2. 如果x、y之间呈直线关系，可作直线回归的统计处理，计算： 回归方程y=a+bx和相关系数r。 其结果可以显示实验方法的测定结果有无系统误差存在。 截距a反映恒定系统误差的大小； 斜率b反映比例系统误差的大小； 相关系数r反映两种方法相关性的密切程度。 注意事项 1. 选择试验样品 一般作40~100例，包括常规工作中可能遇到的整个分析范围（其中25%的标本低于参考范围下限，50%标本在参考范围之内，25%标本高于参考范围），选择合适的样品分析范围比增加样品的数目更为重要。 注意事项 2. 试验方法 一般每个样品用两种方法各测一次，最好每个样品用两种方法各测定两次，在做双份第二次测定时，标本顺序应全部倒过来，最好在4h内完成。 3. 对比方法