第七章植物原生质体培养及细胞融合2014.pptVIP

原生质体培养意义 是植物细胞工程的核心技术。 1. 除去了细胞壁， 为植物细胞之间的融合扫平了障碍， 实现体细胞杂交，为制造新杂种开辟了道路。 (克服远缘杂交不亲和性) 2. 原生质体是各种遗传操作的理想受体， 从而可以进行品种的遗传改良。 可摄入外源DNA，细胞器、细菌或病毒颗粒， 为高等植物的遗传饰变打下基础。 3. 获得细胞无性系和选育突变体的优良起始材料。 材料预处理 意义 ▲提高原生质体的分裂频率； ▲逐步提高植物材料的渗透压，以适应培养基中的高渗环境。 方法 ◆暗处理 豌豆枝条取下后，分离原生质体前，先在黑暗中（一定湿度）放1-2d， 提高原生质体存活率高，并能继续分裂； ◆预培养 羽衣甘蓝先去叶下表皮，再在诱导愈伤组织的培养基中预培养7d，再去壁， 原生质体高度液泡化，叶绿体也解体； ◆低温处理 龙胆试管苗的叶片只有用4℃低温处理后，分离得到的原生质体才能分裂。 （在很多情况下材料不必经过专门的预处理） 细胞壁的组成 纤维素 半纤维素 果胶质 少量蛋白质 25-50％ 53％ 5％ 纤维素酶 半纤维素酶 果胶酶 酶的种类及特点 ◆ 纤维素酶 主要含有 纤维素酶C，作