维生素测定探究.ppt

食品中维生素的测定 Determination of vitamins in food 一、维生素及其测定意义 脂溶液性维生素包括维生素A、维生素D、维生素E、维生素K。水溶性维生素包括硫胺素（维生素B1）、核黄素（维生素B2）、吡哆醇（维生素B6）、烟酸（尼克酸、於酸、维生素PP）、氰钴胺（维生素B12）、抗坏血酸（VC）等。 二、维生素的测定 （一）荧光分析法简介（Fluorescence analysis ） 1、有关荧光的概念 荧光；荧光物质；激发光；发射光。 2、定性分析 荧光分析法简介 3、定量分析 IF = f c 式中： IF——物质被紫外线照射后所发射出的荧光强度 f——物质对紫外线的吸收系数 C——溶液浓度 4、仪器 测量荧光的仪器有光电荧光计和荧光分光光度计。 see fig.3-23,3-24 （二）维生素A(vitamin A)的测定 １、三氯化锑比色法 （1）原理 （2）方法提要 用乙醚提取样品中的脂溶性物质→皂化→乙醚提取维生素A→净化处理乙醚提取液→挥干乙醚→氯仿溶解→620nm测定，与标准系列比较，比色定量 （3）特点及适用范围 （4）注意事项 维生素A(vitamin A)的测定 ２、紫外分光光度法 原理 方法概要 抽提脂溶性物→皂化→提取→洗涤→蒸发醚层→异丙醇定溶→紫外分光光度计测定，波长328nm。 特点及适用范围 （三）胡萝卜素的测定 1 IUβ-胡萝卜素 ≈0.6μgβ-胡萝卜素 1μgβ-胡萝卜素相当于0.167μgVitA 测定胡萝卜素的常用方法: 柱层析 纸层析(见图1-20 )。 （四）维生素B1（thiamin）的测定 1、原理 ------硫色素荧光法 2、方法提要 硫色素荧光法分四步：维生素B1的提取、分离提纯、氧化与硫色素的提取、荧光测定。 （1）提取 （2）分离提纯:人造沸石交换柱(图3-25) （3）氧化—硫色素的生成与萃取:碱性铁 氰化钾（或溴化氰） （4）荧光测定:激发光λ365nm，发射光 λ435nm。荧光计用标准物质硫酸奎 宁校正。 3、注意事项 （五）维生素B2（riboflavin）的测定 ---核黄素荧光法 １、原理 ２、方法提要 分四步：样品处理、沉淀杂质、纯化、测定。 （１）样品处理 （２）沉淀杂质 （３）纯化 （４）测定：激发光λ440nm，发射光λ525nm. 连二亚硫酸钠（Na2S2O4）; 荧光红钠 （六）维生素C（vitamin C, ascorbic acid）的测定 还原型抗坏血酸 脱氢抗坏血酸 二酮古乐糖酸 维生素C的测定方法 1、 2，6—二氯靛酚滴定法 2、 2，4—二硝基苯肼法 2，6—二氯靛酚滴定法 与2，4—二硝基苯肼法对比 ３、荧光法