病理方法学课程.pptVIP

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  • 2017-02-12 发布于湖北
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细胞侵袭试验 5.下室加入600 μl的有血清的培液,并加入相应浓度的药物和DMSO。 6.37度孵育16小时。 7.90%乙醇固定30分钟。 8.PBS洗两次,0.2%结晶紫染色30分钟,PBS洗两次,用酒精棉球擦去上表面的细胞,显微镜下拍照。 9.10%乙酸抽提20分钟,酶标仪600 nm测OD值。 10.抑制率(%)=(OD对照孔-OD给药孔)/ OD对照孔×100%。 Transwell Transwell:trans-这个词根有转移、转运、穿过等意思,well 有小室的意思,可以从字面上理解,这是一类有通透性的杯状的装置,根据Corning公司的Transwell说明书中的介绍,可以认为这是一种膜滤器(Membrane filters),也可认为是一种有通透性的支架(permeable supports)。 杯子底层的一张有通透性的膜,而杯子其余部分的材料与普通的孔板是一样。这层膜带有微孔,孔径大小有0.1--12.0μm,根据不同需要可用不同材料,一般常用的是聚碳酸酯膜(polycarbonate membrane)。 将Transwell小室放入培养板中,小室内称上室,培养板内称下室,上室内盛装上层培养液,下室内盛装下层培养液,上下层培养液以聚碳酸酯膜相隔。 (1)共培养体系:? 小于3.0um孔径条件下,细胞不会迁徙通过,因此,若研究不涉及细胞运

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