泛素蛋白酶体途径研究进展李淼.docVIP

泛素蛋白生理与病理功能的研究进展 李 淼 （中山大学生命科学院09级生物科学与技术 广州 510275） 摘要：泛素是一种在细胞内广泛分布的高度保守的小蛋白。泛素-蛋白酶体途径（UPP）主要由泛素活化酶、泛素结合酶、泛素蛋白连接酶和26S蛋白酶体组成。初步研究表明，泛素-蛋白酶体途径在植物生长调节、动物生殖发育、肿瘤发生和神经疾病起到重要作用。研究泛素蛋白生理与病理功能能够帮助我们了解致病机理，找到治疗疾病的新方法。 关键词：泛素；泛素-蛋白酶体途径；肿瘤；神经性疾病 生物体内存在两种蛋白质降解过程：一种不需要能量，比如发生在消化道中的降解，只需蛋白质降解酶的参与；另一种需要能量，是一种高效率、指向性很强的降解过程。2004年诺贝尔化学奖授予以色列科学家阿龙·切哈诺沃、阿夫拉姆·赫什科和美国科学家欧文·罗斯，以表彰他们发现了泛素调节的蛋白质降解[1]。泛素-蛋白酶体属于第二种降解过程。 1 泛素-蛋白酶体途径 1.1 泛素蛋白 泛素（Ubiquitin，Ub）是一种多肽，由76个氨基酸构成，分子质量为8.45kD。泛素的氨基酸序列具有高度保守性，以共价键结合到底物蛋白质的赖氨酸残基上，被4个以上泛素标记的蛋白质将送到26S蛋白酶体处。泛素蛋白游离存在于细胞内或共价结合到各种胞浆、核及膜蛋白上，是能量依赖的泛素-蛋白酶体的重要组分[2]。 泛素活化酶（UBA, E1）是泛素与底物蛋白结合所需的第一个酶，可以水解ATP，与泛素的羧基末端形成高能硫酯键而激活泛素，为细胞的活性和生存所必需。泛素连接酶（UBC, E2）和泛素-蛋白连接酶（E3）是泛素与蛋白底物结合所需的第二个和第三个酶，E3多协助E2结合底物蛋白，能够识别底物蛋白，使底物蛋白发生选择性泛素化。 1.2 蛋白酶体 蛋白酶体是一种具有多个亚单位组成的蛋白酶复合体，蛋白酶体沉降系数为26S，故又称26S蛋白酶体。它可分为一个具有调节功能的调节颗粒19S和一个具有蛋白酶体催化活性的核心颗粒20S。活性的调节因子主要有两种：19S调节复合体和11S调节复合体。调节复合体位于20S的两端或一端，不同的调节复合体与20S蛋白酶体结合后功能不同，20S-19S主要参与降解泛素化蛋白。 1.3 泛素-蛋白酶体途径（UPP） 泛素经过E1、E2、E3酶一系列催化步骤才能结合底物蛋白。UPP可识别、标记、进而降解那些已经被泛素化的蛋白质。整个降解过程需要三个步骤：（1）底物识别：能进行泛素化的底物可带有特殊的降解信号；（2）泛素与底物的共价连接：多步骤过程，需要ATP提供能量，可将多个泛素连接到底物上，常形成多聚泛素链；（3）降解靶蛋白，同时释放出游离的泛素，从而完成泛素循环[3]。 UPP降解许多蛋白，这些蛋白包括明确的降解信号或称“降解决定子”。“降解决定子”是通过泛素系统降解蛋白的基本因素，一旦多聚泛素化链接到蛋白上，蛋白必将运送到蛋白酶体，被展开然后降解，这些步骤依赖于“降解决定子”或蛋白水解底物的特性[4]。 1.4 泛素化与去泛素化 泛素化是指真核细胞内需要降解的靶蛋白在ATP的作用下被泛素标记形成缀合物。泛素化的过程需要E1、E2、E3三种泛素酶的参与。在泛素的经典通路中，泛素化蛋白最终在蛋白酶体中完全降解；而在泛素的非经典通路中，被泛素化的蛋白质直接参与各项生命活动。泛素化修饰有三种不同类型：单泛素化、多个单泛素化和多聚泛素化。 去泛素化是指泛素化的蛋白质在特异性水解酶（去泛素化酶DUBs）的作用下解离泛素分子的过程。去泛素酶能水解泛素间的键，也能水解泛素与靶蛋白之间的键，并重新释放出泛素分子。 2 UPP生理及病理功能 2.1 UPP与生理功能 2.1.1 信号转导 有资料显示，不依赖蛋白酶体功能的泛素化对胞吞过程起重要作用。单泛素化调控受体胞吞的多个阶段，且诱导受体-配体复合体进入溶酶体降解[5]。泛素化会启动依赖网格蛋白的胞吞作用。泛素-蛋白酶体通路在胞质中的信号功能主要是降解大部分错误合成蛋白，参与调控胞质蛋白含量。另外，泛素还参与调控Notch信号通路，单泛素化修饰组蛋白和转录因子[6]。研究发现，DNA损伤与修复与泛素化有密切关系。增殖细胞核抗原（PCNA）是一种持续复制促进因子。对于PCNA的不同类型的泛素化修饰将决定不同类型DNA聚合酶与DNA结合，从而决定进行某一特定类型的DNA修复[7]。 2.1.2 调节细胞周期 细胞周期因子（cyclin）首先被泛素化，然后由26S蛋白酶体降解，导致周期因子依赖的激酶失活，从而使细胞有丝分裂期中止。细胞周