动物实验的基本操作方法.pptx

动物实验的基本操作方法报告主要内容 实验动物的识别抓取标记方法肿瘤细胞皮下接种肿瘤大小测量给药途径和方法实验动物的处死实验动物的麻醉实验标本的采集如何判断小鼠性别 成年鼠性别很易区分，雄鼠的阴囊明显；雌鼠可见阴道开口和五对乳头。生殖器与肛门的距离也可判定，近者为雌性，中间无毛；远者为雄性，中间有毛。仔鼠或幼鼠则主要从外生殖器与肛门的距离判定。♂♀如何抓取小鼠先用右手抓住鼠尾并提起，放在实验台上，在其向前爬行时，顺势用左手的拇指和食指抓住其两耳和头颈部皮肤，然后把鼠体翻转向上置于左手心中，把后肢拉直，用左手的无名指及小指夹住鼠尾部即可。对于操作熟练者，可采用左手一手抓住法，右手可不必放下注射器等工具。操作时应小心被小鼠抓咬。不同的操作也对应着不同的抓取方式，需在技能练习中慢慢体会。如何标记小鼠耳钉标记法：用左手食指及拇指抓紧鼠左耳及左半边脸和颈部，背部朝上，用酒精棉擦拭一下右耳，右手持装好耳钉的耳钉夹，将耳钉开口夹住尽量平展的右耳，最好夹住耳朵中部到根部的位置防止太边上容易脱落，用力握紧耳钉夹，使耳钉尖端扣入凹槽。注意动作要轻要稳以防用力过猛扯坏小鼠的耳朵；耳钉有数字的一面尽量朝外方便读数。建议两个人共同完成。如何标记小鼠无耳钉标记法：1、剪耳法在小鼠双耳的不同部位上剪一三角口来表示不同号码。一般习惯是：左上为1，左下为2，右上为3，右下为4，左耳两刀为5，左右耳各一刀为6，右耳两刀为7，不剪为82、画尾巴法一横为1，两横为2，三横为3，四横为4，一竖为5，一竖一横为6，一竖两横为7，一竖三横为8，一竖四横为9，不画为10。9#5#实验动物的给药途径和方法1、经口给药灌胃（po）这是一种用处较多的给药方法。有些药物采用其他注射方法效果不好，而用此法反而效果好；有些药物（如临床上的口服药用于动物实验）不能采取静脉注射、肌肉注射等方法而必须采用此法。实验动物的给药途径和方法用左手拇指和食指抓住鼠两耳和头部皮肤，将鼠抓持在手掌内，使其腹部向上，头部向上有一定的倾斜度，右手持注射器，从小鼠口角插入口腔，压其头部，使口腔和食管成一直线，再紧沿上腭和咽后壁慢慢插入食管，使其前端到达膈肌位置，然后把药液灌入胃内。灌时若很通畅，表示针头已进入胃内；若不通畅，动物有呕吐动作或强烈挣扎，表示针头未插入胃内，要立即拔出并按上述方法重操作。灌胃抓法要点这种抓法不要抓得太紧，以免颈部皮肤向后拉，勒住食管，灌胃针不易插直或容易损伤食管；也不能抓得不紧，否则鼠在受压迫时容易挣脱掉而咬伤操作者的手指。也可用左手食指及拇指抓紧鼠右耳的方法来避免上述缺点灌胃要点动物要固定好；进针方向正确，要沿着口角进针，再顺着食管方向插入胃内，绝不能进针不顺而强行向里插，否则会捅破食管，甚至注入肺内而造成动物死亡。常用灌胃量为0.1-0.2ml/10g。实验动物的给药途径和方法2、注射给药静脉注射（iv）小鼠一般采用尾静脉注射1、固定： 用小鼠固定器将小鼠固定好,将尾巴拉直，绷紧，这是成功的第一步。实验动物的给药途径和方法2、血管的选择：小鼠尾部有三条静脉，左右两边的静脉比较浅，容易穿刺；中间一条位置较深，建议不选择。穿刺先远后尽，不要一开始就从尾根部，这样的好处是万一一次扎不进，还可以继续使用此血管。选择尾下1/4-1/3处比较好（约距尾尖2-3cm，因为尾梢端皮薄静脉浅，易于刺入；但不可离尾尖太近，防止尾巴碎断或不好固定）。实验动物的给药途径和方法熟练的话看哪里血管清晰就扎哪里。 一般用75%酒精反复擦拭穿刺血管，使其充盈，并且使皮肤角质层软化，利于穿刺。或者在注射之前用约50度温水泡大约2分钟，使血管充分舒张，用干棉球擦干。或者直接用手握住尾巴，用手心的温度使其血管充盈。实验动物的给药途径和方法3、针的选择：4号1ml注射器4、注射手法：注射时左手扯尾，用左手的食指,中指,无名指及大拇指将小鼠尾巴固定。右手持注射器，从中指及无名指与拇指接触处稍上方进针，进针时针尖朝下，使针头与尾部近似平行刺入尾静脉（针头与尾部夹角小于10°）在尾静脉内平行推进少许。针扎入时有落空感，针头沿血管进入，肉眼可关察到血液充盈针尖的那一瞬间，这是关键。实验动物的给药途径和方法如果针头在血管中前进，可明显地感觉到针行通畅，毫无阻力；若手感针行有阻力，注射部位皮下发白，说明针头未刺入静脉内，应换部位重刺。但要尽量做到一次注射成功，因为重刺会增加注射的困难；另外，第二次重刺，也可能失去了尾静脉注射的最佳位置。进血管后注意保持稳定，左手的三指捏住尾巴，并连针头和鼠尾一起捏住，以防鼠活动时针头脱出。实验动物的给药途径和方法针尖很容易刺穿血管的；推药时，要缓推。要注意不能有气泡进入，否则将导致动物死亡。注射完毕拔出针头，随即用左手拇指按住注射部位，右手放下注射器，取一棉球按压注射部位，使血液和药液不流出。至于