第三章微生物的培养和分离.doc

第三章 微生物的培养和分离本章 2.如何配制培养基； 3.如何培养与分离微生物； 4.微生物的生长（规律、测定）。 3.1微生物的营养物质和营养类型 3.1.1营养物质的类型和水平 微生物的营养物质具体可划分为碳源、氮源、能源、无机盐、生长因子和水六大类。 碳源质碳源(source of carbon)是指在微生物生长过程中可为微生物提供所需碳元素的物质。 微生物可利用的碳源从大范围来分可分为有机碳源和无机碳源。对于异养微生物来说，最适碳源只是“C·H·O”型。其中糖类是最广泛利用的碳源。 氮源质 氮源(source of nitrogen)即能提供微生物生长繁殖所需氮元素的营养源物质。这类物质主要用来合成细胞中的含氮物质微生物对氮源的利用也是具有选择性的微生物吸收利用铵盐和硝酸盐的能力较强。一部分微生物不需要氨基酸作为氮源，它们能把非氨基酸类的简单氮源(如尿素，铵盐等)自行合成所需要的一切氨基酸，这一类生物可称其为“氨基酸自养型生物”；反之，另一部分微生物则需要从外界吸收现成的氨基酸作为氮源物质，则可将其归属为“氨基酸异养型生物”。所有的动物和大量的异养微生物均是氨基酸异养型生物，而所有的绿色植物和很多的微生物都是氨基酸自养型生物。 能源微生物能源(energy source)是指能为微生物的生命活动提供能量来源的营养物质或辐射能。 能转化能源的微生物即化能微生物可分为自养型和异养型。其中化能异养型微生物所利用的能源即碳源；化能自养型微生物，它们所利用的能源则都是还原态的无机物。 无机盐 无机盐可为微生物提供除碳源、氮源以外的各种重要元素。凡是微生物生长所需浓度在10-3～10-4mol/L范围内元素，可称为大量元素；凡微生物生长所需浓度在10-6～10-8mol/L范围内元素，则称为微量元素。 主要生理功能：构成细胞的组成成分；作为酶活性中心的组成部分；维持生物大分子和细胞结构的稳定性、维持酶的活性；调节细胞渗透压、氢离子浓度和氧化还原电位；作为某些自养菌的能源。生长因子生长因子(growth factor)，即通常所指的那些微生物生长所必需但需要量很小，微生物自身不能用简单的碳源或氮源自行合成或合成量不足以满足机体生长需要的有机化合物。广义的生长因子除了维生素外，还包括碱基、卟啉及其衍生物、胺类、甾醇、C4～C6的分或直链脂肪酸，以及需要量较大的氨基酸等；而狭义的生长因子一般仅指维生素。 生长因子分为维生素(vitamin)、氨基酸、碱基(嘌呤及嘧啶)、脂肪酸等类脂四大类。 一般情况下，在配制培养基时，如果配制的是天然培养基，则可加入富含生长因子的原料――酵母膏(yeast extract)、玉米浆(cornsteep liquor)、肝浸汁(liver infusion)、麦芽汁(malt extract)或其他新鲜的动植物组织浸液；如果配制的是组合培养基，则可加入复合维生素溶液。 水 水在微生物细胞中的生理功能主要有：①直接参与一些生化反应，是参与细胞内的一系列化学反应的重要元素，如蓝细菌利用水作为CO2的还原剂；②作为微生物机体内一系列生理生化反应的介质，起到运输介质和溶剂的作用，使营养物质的吸收和代谢产物的分泌得以实现。③维持蛋白质、核酸等生物大分子稳定的天然构象；④由于水是热的良导体，具有较高的比热，因此能有效地吸收微生物代谢过程中产生的热并及时地将热迅速散发出体外，从而有效地控制细胞内温度的变化；⑤保持充足的水分是细胞维持自身正常形态的重要因素；⑥微生物可通过水合作用与脱水作用来控制由多亚基组成的结构，如酶、微管、鞭毛及病毒颗粒的组装与解离。 3.1.2营养类型及其与污染治理的关系 目前常用的分类方法是以能源、碳源的不同，将绝大部分微生物分成如下所示四大型： 光能自养型(Photolithoautotroph，PLA) 光能自养型(光能无机自养型)微生物以CO2作为唯一或主要的碳源，以光为生活所需能源，以无机物(如硫化氢、硫代硫酸钠或其他无机硫化物)作为供氢体，使CO2还原成细胞的有机物。实例： 蓝细菌 绿硫细菌和紫硫细菌 光能异养型(Photoorganoheterotroph，POH) 光能异养型微生物同样利用光作为能源，但利用有机物作为供氢体，不能以CO2作为唯一或主要的碳源，一般可同时以CO2和简单的有机物为碳源，所以该营养类型的细菌对于高浓度有机废水的厌氧处理有重要作用。另外，光能异养菌生长时，一般常需要外源的生长因子。如红螺细菌： 三、化能自养型(Chemolithoautotroph，CLA) 化能自养型微生物是以CO2或碳酸盐为