26DNA的复制与修复.docVIP

第34章、DNA的复制与修复（下册 P406） 本章的重点：本章是重点，要求掌握：一、半保留复制，掌握半保留复制的概念。（一）半保留复制的实验依据，了解半保留复制的实验依据。（二）半保留复制的意义，熟悉半保留复制的意义，半保留复制与遗传相对保守性之间的关系。二、DNA复制的酶学掌握DNA复制系统的组成（底物，聚合酶，模板，引物，其他酶和蛋白质因子）。（一）复制的化学反应，熟悉复制过程中磷酸二酯键的形成，复制过程中新链延伸的方向性。（二）DNA聚合酶 熟悉大肠杆菌DNA聚合酶的不同种类和功能。了解真核生物的DNA聚合酶的种类及功能。了解真核生物DNA-pol γ与mt DNA复制。熟悉DNA聚合酶的两种催化活性（聚合，外切）。熟悉复制的保真性的三种机理及DNA聚合酶所起的作用。（三）复制中解链和DNA分子的拓扑学变化，熟悉解螺旋酶、DNA拓扑异构酶、单链DNA结合蛋白在DNA复制中的主要作用。（四）引物酶和引发体，熟悉引物酶的本质及其作用（构成引发体、催化引物RNA生成）。（五）DNA连接酶，熟悉DNA连接酶的作用。了解DNA聚合酶、拓扑酶及连接酶三者的活性对比。三、DNA生物合成过程，（一）复制的起始，熟悉DNA复制起始概况（选点，解链解旋，引发体及引物的生成）及各种酶、蛋白质因子的作用。熟悉双向复制、复制叉、复制子的概念。（二）复制的延长,熟悉DNA复制延长的一般概况、模板阅读方向及复制的不连续性（双向性, 领头链，随从链）。掌握冈崎片段的概念。了解滚环复制。（三）复制的终止，熟悉复制终止的概况，引物的取代及DNA连接酶的作用，新链的完整化。熟悉真核生物的端粒和端粒酶，了解端粒与细胞生长、肿瘤形成的关系。四、DNA损伤（突变）与修复（一）突变的意义，熟悉突变的概念，了解突变的后果（积极，有害，多态）。（二）引发突变的因素，了解引发突变的物理及化学因素。（三）突变分子改变的类型，了解DNA突变时DNA分子改变的类型（错配、缺失、插入、框移突变、重排）（四）DNA损伤的修复，了解四种修复途径的概况。五、逆转录现象和逆转录酶，掌握逆转录的概念，熟悉逆转录酶的作用及应，了解逆转录现象，逆转录病毒。 本章的主要内容： DNA是生物遗传的主要物质，DNA复制即以原来DNA分子为模板合成出相同分子的过程。 9-1 DNA复制 生物系统的遗传信息主要表现为DNA分子中特异的核苷酸排列顺序。DNA整个分子复制，可以将遗传信息由亲代传给子代，碱基配对原理是遗传信息传递的基本机制。 DNA的半保留复制： 一个亲代DNA分子变成两个子代分子，每个子代分子双链中一条来自亲代分子，一条是新合成的互补链，这种复制方式称为半保留复制。见P407 图34-2。 证实：同位素标记法 在15NH4Cl培养基中连续培养E. coli 12代，制备15N标记的E. coli的DNA。 半保留复制证实：将15N DNA的E. coli转移到14N氮源中培养，一代后，所有DNA密度介于15N-DNA和14N-DNA之间，形成一半含15N，一半含14N的杂合分子。两代后，14N分子和14N-15N杂合分子等量出现。 当把14N-15N杂合分子加热变性，可分开成14N-链和15N-链两条链，且这些亚单位经许多代复制仍保持完整性。 DNA半保留复制机制可以说明DNA在代谢上的稳定性，是所有已知基因的复制形式。即使一些病毒在生命周期一部分中出现单链DNA，但复制时必为双链DNA。 DNA复制的起点和方式： 复制叉：DNA复制生长点处形为叉形，故称为复制叉。新DNA合成与亲代DNA解链在同一部位同时进行。 DNA复制时大多是双向进行，形成两个复制叉或生长点。也有单向的，只形成一个复制叉或生长点。见P408 图34-4。 对称复制：两条链同时进行复制。 不对称复制：一条链复制后再进行另一链的复制。 环形DNA复制时在显微镜下可以看到形如眼形的θ型结构。P409 图34-5。 P411 图34-8显示了DNA不同复制方式。 A：直线双向， B：多起点双向， C：θ型双向， D：θ型单向， E：滚动环， F：D环， G：2D环。 细菌DNA复制叉移动速度大约为5万bp/分，E. coli完成复制40分钟，在丰富培养基中20分钟即可分裂一次。 DNA聚合反应有关的酶： DNA聚合反应和聚合酶 DNA聚合反应需要下面五个要素 底物：四种脱氧核苷三磷酸（dATP，dGTP，dCTP和dTTP），统称为dNTP，且四种都必须存在。 模版：指导反应进行。模版可以是单链DNA，也可以是在一处或几处断开的双链DNA。 引物链：为具有3‘-OH的RNA（体内）或DNA（体外）短链。 DNA聚合酶：为模板指导酶，按模版