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细菌抗药性的产生 抗性菌株特点: A、细胞质膜透性改变,使抗生素不进入细胞或进入细胞后被细胞主动排出; B、药物作用靶改变; C、合成了修饰抗生素的酶; D、抗性菌株发生遗传变异,导致合成新的多聚体,以取代或部分取代原来的多聚体; 避免出现细菌的耐药性的措施: (1)第一次使用的药物剂量要足; (2)避免在一个时期或长期多次使用同种抗生素; (3)不同的抗生素(或与其他药物)混合使用; (4)对现有抗生素进行改造; (5)筛选新的更有效的抗生素; 思考题 1、微生物的生长测定方法有哪些? 2、微生物的生长曲线分为几期?划分依据是什么? 3、什么是连续培养?常用的连续培养技术有哪些? 4、影响微生物生长的环境因子有哪些? 5、什么是抗代谢物?磺胺类药物的作用机理? 6、紫外诱变原理是什么? 7、抗生素的作用机制有哪些?为何微生物会出现耐药性? * * * * 2.对数期(logarithmic phase) 以最大的速率生长和分裂,细菌数量呈对数增加,细菌内各成分按比例有规律地增加,表现为平衡生长。 特点: 生长速率最大,即代时最短 菌体大小、形态、生理特征等比较一致 代谢最旺盛 细胞对理化因素较敏感 影响因素: 菌种:不同的微生物及微生物的不同菌株代时不同; 营养成分:在营养丰富的培养基中生长代时短; 营养物浓度:在一定范围内,生长速率与营养物浓度呈正比; 培养温度:在一定范围,生长速率与培养温度呈正相关。 延长措施:定时定量加入营养物质,同时排出代谢产物,或使用连续培养。 应用意义 ①由于此时期的菌种比较健壮,增殖噬菌体的最适菌龄;生产上用作接种的最佳菌龄; ②发酵工业上尽量延长该期,以达到较高的菌体密度 ③食品工业上尽量使有害微生物不能进入此期 ④是生理代谢及遗传研究或进行染色、形态观察等的良好材料。 3、 稳定期(stationary phase) 由于营养物质消耗,代谢产物积累和pH等环境变化,逐步不适宜于细菌生长,导致生长速率降低直至零,即细菌分裂增加的数量等于细菌死亡数。 特点: ①新增殖的细胞数与老细胞的死亡数几乎相等,微生物的生长速率处于动态平衡,培养物中的细胞数目达到最高值。 ②细胞分裂速度下降,开始积累内含物,产芽孢的细菌开始产芽孢。 ③此时期的微生物开始合成次生代谢产物,对于发酵生产来说,一般在稳定期的后期产物积累达到高峰,是最佳的收获时期。 产生原因: 营养物尤其是生长限制因子的耗尽 营养物的比例失调,如碳氮比不合适; 有害代谢废物的积累(酸、醇、毒素等) 物化条件(pH、氧化还原势等)不合适 应用意义: 稳定期的长短,与菌种和外界环境条件有关。发酵生产形成的重要时期(抗生素、氨基酸等),生产上应尽量延长此期,提高产量,措施如下: 补充营养物质(补料) 调pH 调整温度 对好氧菌增加通气量或搅拌 4、衰亡期(decline phase) 营养物质耗尽和有毒代谢产物的大量积累,细菌死亡速率超过新生速率,整个群体呈现出负增长。 特点: ① 细胞死亡数增加,死亡数大大超过新增殖的细胞数,群体中的活菌数目急剧下降,出现“负生长”。 ② 细胞进行内源性呼吸(因为营养缺乏),细胞内颗粒更明显,原生质中出现液泡与空泡,出现多形态、畸形或衰退形,芽孢开始释放。有些革兰氏染色反应阳性菌变成阴性反应等。 ③ 因菌体本身产生的酶及代谢产物的作用,使菌体死亡。 衰亡期比其他各时期时间长,它的长短也与菌种和环境条件有关。 产生原因:生长条件的进一步恶化,使细胞内的分解代谢大大超过合成代谢,继而导致菌体的死亡 一、影响微生物的物理因素 温度 酸碱度 渗透压 水分 氧化还原电位 辐射作用 超声波 第三节 影响微生物生长因素 温度影响生物体内的许多生化反应,因而影响代谢活动。 温度可引起环境因子变化,可最终影响倍增时间,影响微生物群生态结构。 温度对微生物的影响具体表现在: 影响酶活性。温度变化影响酶促反应速率,最终影响细胞合成。 影响细胞膜的流动性。温度高,流动性大,有利于物质的运输,温度低,流动性降低,不利于物质运输,因此,温度变化影响营养物质的吸收与代谢产物的分泌。 影响物质的溶解度。对生长有影响。 1、温度 只能在一定温度范围内生长,在这个范围内,每种微生物都有自己的生长温度三基点,即最低、最适、最高生长温度: 处于最适生长温度时,生长速度最快,代时最短。 超过最低生长温度时,微生物不生长,温度过低,甚至会死亡。 超过最高生长温度时,微生物不生长,温度过高,甚至会死亡。 高温下蛋白质不可逆变性,膜受热出现小孔,破坏细胞结构(溶菌),用于灭菌。 低温可降低代谢活力,使生长繁殖停滞,故广泛应用于保藏菌种。 但
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