芦丁的提取与定性反应.pptVIP

天然药物化学实验人民卫生出版社 实验二 芦丁的提取与定性反应 概 述 黄酮类化合物广泛存在于自然界，是一类重要的天然有机化合物。其不同的颜色为天然色素家族添加了更多色彩。这类含有氧杂环的化合物多存在于高等植物及羊齿类植物中。 黄酮类化合物在花、叶、果等组织中多以苷的形式存在，而在木部坚硬组织中，多以游离苷元形式存在。 黄酮苷类虽有一定极性，可溶于水，但却难溶于酸性水，易溶于碱性水，故可用碱性水提取，再将碱水提取液调成酸性，黄酮苷类即可沉淀析出。此法简便易行，芦丁、橙皮苷、黄芩苷提取都应用此法。 一 实验目的和要求 实验目的： 通过芦丁的提取与精制掌握碱-酸法提取黄酮类化合物的原理及操作 通过芦丁结构的检识，了解苷类结构研究的一般程序和方法 了解UV及NMR在黄酮类化合物结构鉴定中的应用 实验要求 获得三个化合物：芦丁、槲皮素、芦丁的全乙酰物 能根据化学实验及UV、NMR数据初步推断出芦丁的结构。并对黄酮类化合物的结构测定有一般性的了解 实验流程（第一次实验） * * 芦丁的提取与定性反应 芦丁的提取与定性反应 槲皮素 芦丁 芦丁十乙酰化物 芦丁的提取与定性反应 搅拌下加入石灰乳 加水300ml 槐花米（15g） 调节PH8-9 直火加热 保持微沸30min 双层滤纸趁热抽滤 滤液 残渣 在60-70度下，用浓盐酸调PH3-4 静置 提取 芦丁的提取与定性反应 注意煤气开关的方向，注意用火安全 注意及时补充水和石灰乳，维持PH 8~9 趁热抽滤时，注意防止滤液因减压而沸腾。 1.5g CaO 加10ml水 定性反应 盐酸-镁粉反应 将样品溶于1ml乙醇，加入少许镁粉振摇，滴加几滴浓盐酸，1-2min内，观察颜色变化。 Molish反应 将样品溶于1ml乙醇，加入等体积10%α-萘酚溶液，倾斜试管，摇匀，沿管壁滴加浓硫酸，注意观察两界面产生的变化。 黄酮母核 苷类 芦丁的提取与定性反应 黄酮苷的水解 第一次实验所得滤液 滤液 沉淀（粗品芦丁） 均分2份 重结晶 水解 抽滤 按1:60量加入蒸馏水，沉淀悬浮于蒸馏水中，加热煮沸15分钟后，趁热抽滤 残渣 滤液 冷却 静置，抽滤 精制芦丁 （IR烘干、备用） 按1:70量加入2%硫酸，加热40min，放冷静置，抽滤 沉淀 滤液 干燥 槲皮素 （ IR烘干、备用） 糖鉴定 芦丁的提取与定性反应 （第二次实验） 如果放置滤液的锥形瓶中长菌，将菌挑出弃去。抽滤时用双层滤纸，其中一张做天平平衡用。 酸水解过程中，注意补充蒸馏水，维持原体积。 2%的硫酸用98%浓硫酸自己配制，注意浓硫酸和水的加入顺序。 抽滤时，热烧杯勿直接放在冷实验台上，防止烧杯炸裂。 糖的鉴定 水解所得滤液 用Ba(OH)2乳调PH值至中性，折叠滤纸过滤 1.5g Ba(OH)2加10ml水 残渣 滤液 水浴蒸干，放冷 加1ml95%乙醇溶解 样品溶液 纸色谱 芦丁的提取与定性反应 注意事项 纸色谱时，展开2cm即可。 纸色谱时，弧形点样，滤纸不折叠，并用铅笔划线。 纸色谱时，标准品点样1次，样品点样3次。 纸色谱展开后，红外灯下将滤纸烤干后显色，喷显色剂后红外灯下烤5-6min。 纸色谱展开后，废展开剂倒入废液瓶中。 糖的纸色谱鉴定 标准品：葡萄糖、鼠李糖 展开剂：BAW（4：1：5） 显色剂：邻苯二甲酸苯胺 点样 层析 芦丁的提取与定性反应 展开 芦丁的提取与定性反应 显色（烘烤） 结果 芦丁的全乙酰化 芦丁 0.1g 加入2ml无水吡啶 加入8ml醋酐 反应液 直火，水浴上回流30min，放冷，搅拌下将反应液倒入70ml水中，一直搅拌到油滴消失，白色沉淀析出为止 反应液 抽滤，干燥 反应物 防 水 芦丁的提取与定性反应 干燥的50ml圆底烧瓶勿洗 *