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实验十二、透射电镜标本制备方法 （选作） 透射电镜标本制备方法 薄片（〈1000埃） 1 制备硬标本块儿后超薄切片（最常规） 2 溶液成膜（颗粒〈1000埃： 细胞碎片，病毒，生物大分子） 3 复型薄膜（在组织细胞表面或裂面喷上一层金属膜，将膜剥离后观察） ξ1制备硬标本块后超薄切片 冰冻块切片： 简便，快，结构保存相对差，价格贵 树脂块切片 复杂，慢，结构保存较好，价格相对便宜 树脂块的制备 1 取材与固定 [目的] 将所取样本尽可能固定在生活状态下 固定剂： 戊二醛（醛基和氨基反应） 四氧化锇（锇与双键螯合） 多聚甲醛（醛基和氨基反应） 醛基和氨基反应 [小]，[冷]， [快] 将动物麻醉或急性处死，暴露所需器官 剪取小块组织，放在预先冷却的固定液中 在洁净纸片上滴一滴冷却的固定液，取出组织块初步修块 （细长条：L：2-3mm,W：1mm） 转移回冷却的固定液中 常规（两步固定法） GA固定液中4°C 1~2h(中间0.5-1h可取出修块) 转移到冲洗液中（0.18M蔗糖in0.1MPB） 4°C 1~2h(原则上与固定时间相等)，中间换液2次 锇酸固定液中4°C或 R.T.1h dd水中冲洗 *在冲洗液中可存放1~2周，但每周至少换一次液（在固定液中长放易脆） *经GA固定后膜还有一定的渗透作用，在经锇酸固定后