生物技术发酵工程实验方案.docVIP

产蛋白酶菌种的分离筛选及发酵 一、实验流程 二、实验安排 1、2班分为2大组，分别进行平行实验。由各组自行安排实验时间，其中13、14、15三周在指定时间集中实验。几个重要时间节点为：10周正式进入实验程序；第13周获得目标菌株1株；14周完成种子的摇瓶培养；15周分别完成上罐发酵；16周实验收尾工作。 三、发酵工程实验日程表 序号 实验项目 时间 实验内容安排 1 培养基制备与灭菌 预计8学时 固体培养基配制500mL/组，分装2瓶； 培养皿清洗及包扎10副/组；无菌水90mL/瓶，9 mL/试管共6支； 1 mL or2 mL吸管包扎8支/组； 液体培养基制备：500ml/组，分装8瓶，灭菌0.1MPa,20min. 2 菌种分离 预计4学时 1、菌种的分离纯化:超净工作台消毒（UV照射20min）→75%乙醇擦拭台面；分离样品→无菌水溶解(稀释10-2倍)→涡旋震荡5min；倒平板(10副平皿/组)→平板划线分离→30℃倒置培养→目标菌株获得→制片及观察（显微摄影）。 3 种子制备 预计4学时 1、接种准备工作：超净工作台消毒（UV照射20min）→75%乙醇擦拭台面。 2、 纯种培养接种：平板单一菌落→种子培养基（2环/瓶）→涡旋震荡3-5min； 摇瓶培养：摇床设置及调节（30℃，200r/m）→摇瓶固定→启动培养。 4 发酵罐结构认识、操作规程及分批发酵操作