对于聚乙二醇化脂质体引起的加速血液现象的研究.docVIP

对于聚乙二醇化脂质体引起的加速血液现象的研究 　　脂质体可提高被包裹药物的稳定性和改善药物的药动学特性，以及其本身良好的生物相容性，使得其在生物医学和药学中得到了广泛关注和应用。然而，普通脂质体作为药物载体进入血液后，极易被单核巨噬细胞系统(Mononuclear phagocytesystem，MPS)吞噬，导致其在血液中被迅速清除，并蓄积在肝、脾等器官，使药物不能到达靶器官而发挥作用，严重限制了其临床应用。为此，有人将聚乙二醇(Polyethylene glycol，PEG)类脂质插入到脂质体中进行修饰，结果发现此举可明显延长脂质体在体内的循环时间，减少被MPS的摄取，使得靶器官的积累量增加，同时可提高脂质体及包裹物的物理、化学和生物学稳定性。但近几年的研究发现，脂质体的PEG 化也存在一些不容忽视的问题，如向同一动物静脉重复注射(间隔几天)PEG化脂质体时，第2 次注射的PEG化脂质体会从血液中迅速被清除(即Accelerated blood clearance phenomenon，简称“ABC现象”)，从而限制了其临床应用。为了对PEG化脂质体的临床研究和应用提供参考，本文拟以“PEG”“Acceleratedblood clearance phenomenon”“加速血液清除”等组合作为关键词，检索1987-2013 年在PubMed、Elsevier ScienceDirect、维普数据库中关于PEG化脂质体ABC现象的研究进展，并对这种现象的影响因素及解决方案进行综述。结果，共查询到83条文献，其中有效文献37条，现综述如下。 　　1 ABC现象的提出 　　已有报道称，对啮齿类动物和恒河猴反复注射(间隔几天)PEG化脂质体时，第2 次注射的脂质体可从血液中被迅速清除，导致脂质体在体内循环的时间被缩短，同时在肝脏和脾脏的积累量增加，这种现象被称为ABC现象。PEG修饰的脂质体被认为没有免疫原性，并且会明显延长体内循环的时间。但有研究表明，在兔子、恒河猴和老鼠体内重复注射PEG化脂质体(2.5 mu;mol/kg)后，第2 次注射的PEG化脂质体没有显现出应有的长循环特性，相反其在血液中的清除速率加快，并且在肝脏和脾脏的聚集量明显增加，由此大大限制了其临床应用。Dams ET等以99mTc 标记脂质体，将大鼠分为4 组，每组至少接受3 次静脉注射99mTc 标记的脂质体(每只4 mu;mol/kg)，用来研究大鼠重复注射PEG化脂质体的体内分布情况。结果发现，相比与第1 次，第2 次注射的脂质体在血浆中的分布水平明显降低，且肝脏的摄取量(占注射总量的百分比)也从(8.1plusmn;0.8)%上升至(46.2plusmn;9.8)%。对恒河猴进行考察时，发现也产生了明显的ABC现象，脂质体的半衰期由87.5 h 减至14.2 h，而肝脏的摄取量由原来的17.6%增至41.2%[7]。该项研究首次提出了ABC现象。 　　2 ABC现象的机制 　　在发现上述现象后，有研究者认为是PEG与脂质体分离，从而使脂质体暴露于MPS的“监视”之下，进而被吞噬，导致其在血液中的浓度迅速下降。有研究表明，PEG-二硬脂酰磷脂酰胆碱(PEG-DSPE)从脂质双分子层的交换半衰期(指PEG-DSPE 脂质穿过细胞膜的脂质双分子层的时间)接近70h，这一时间远远长于两次注射的间隔时间。因此，此原因并非产生ABC现象的主要原因。在Dams ET等提出ABC现象后，推测可能的原因是一种不耐热的非抗体分子，但并不是免疫球蛋白(Ig)G 和IgM 引起。Laverman P 等通过将预注射脂质体的大鼠血清通过抗大鼠IgM 琼脂糖色谱柱后，得到不含IgM 的大鼠血清，洗脱琼脂糖色谱柱则得到IgM。当向动物体内注射不经处理的大鼠血清时并未引起ABC现象，而注射不含IgM 的大鼠血清时则引起其清除加快，因此得出结论：ABC现象并不是由IgM诱导的。但这与一些ABC现象的相关结论不一致，其可能原因是经过色谱柱分离的IgM 血清中残留IgM。Ishida T等通过电泳法证明了与PEG 化脂质体结合的血清蛋白是IgM，并通过将注射动物的脾脏切除之后连续注射PEG 化脂质体，结果发现未切除脾脏的实验动物血清与脂质体结合的IgM 比切除脾脏组高8 倍，表明脂质体与IgM 的结合是诱导ABC现象的关键因素。综合目前的研究，得出ABC现象的产生机制：第1 次注射PEG 化脂质体到达脾脏后，刺激产生抗PEG-IgM 抗体;第2 次注射后，血液中残存的抗PEG-IgM 抗体选择性地结合在PEG 上，随后激活补体系统，增强了肝脏Kupffer 细胞对脂质体的摄取，于是产生了ABC现象。此外，ABC现象还有其他解释。如Zhao Y等发