常用神经元标记物的医学研究.docVIP

常用神经元标记物的医学研究 　　神经元是完成大脑功能的基本组件，因此要想了解大脑是如何工作的，又是如何出现功能异常的，都需从研究神经元的形态、功能入手。免疫组化技术已经成为神经科学工作者必不可少、也是最有价值的研究工具之一。利用各种细胞组分的抗体，研究者能够将神经元和其他类型脑细胞区分开来，同时可根据细胞形态特征和特定蛋白表达获取感兴趣的信息。而在研究神经发育、神经分化及神经再生领域，未成熟神经元标记物常可标记出那些不同发育阶段的新生神经元，也是该领域研究常用的标记工具。本文综述了常用的神经元标记物和未成熟神经元的标记物的研究进展。 　　1 骨细胞的力学调控概述 　　1.1 神经元核抗原 　　神经元核抗原(neuron specific nuclear protein，NeuN)是一种可溶性核蛋白，1992 年，Mullen 等报道了能够识别脊椎动物神经元特异的核蛋白单克隆抗体的产生，该蛋白被称为NeuN，分子量多为46~48 kD，在体外能与DNA 结合，已成为周围和中枢神经系统成熟神经元的常用标志物。在大鼠，NeuN 广泛表达，大部分神经元(大脑皮质、基底核、脊髓背角等)有明显表达;部分神经元为中等表达(三叉神经脊束核、下丘脑室旁核等);部分神经元为弱表达(孤束核、蓝斑等);而有些核团神经元缺乏NeuN 的表达(视上核、弓状核、迷走神经背核等)。在成年小鼠，NeuN 表达见于小鼠神经系统的大部分神经细胞，原代培养的小脑细胞中亦可检测到NeuN，但在小脑Purkinje 细胞、嗅球僧帽细胞以及视网膜光感受器细胞未见表达。尽管NeuN 的免疫组化检测已经被广泛使用，其功能最近才被了解清楚。研究人员现在已经能够将NeuN 鉴定为Fox-3，Fox-3 蛋白质参与调控的mRNA 剪接。由于Fox-3 由神经系统特异性表达，人们发现它在调节神经细胞分化和神经系统发育中发挥作用。 　　1.2 神经元特异性烯醇化酶 　　神经元特异性烯醇化酶(neuron- specificenolase，NSE)是一种gamma;型烯醇化酶，由Moore 等于1965 年研究神经系统特异蛋白时发现[5]，是由成熟神经元和神经元起源细胞持续表达的胞质蛋白，是参与糖酵解途径的烯醇化酶中的一种，在细胞内能量代谢中起着重要的作用。在发育过程中，NSE 的水平非常低，但在神经元形态和功能成熟过程中增加。虽然NSE 作为神经元标记物得到广泛应用，但需要注意的是，它已被证明在特定条件下在少突胶质细胞中也有表达，并且在少突胶质细胞分化过程中其表达增加，细胞成熟后受到抑制。在病理情况下，神经胶质肿瘤和反应性胶质细胞中也能检测到NSE。近年来，NSE 作为一种神经内分泌肿瘤标志物以及神经元损伤标志物，被国内外关注和研究。临床上NSE 还用于小细胞肺癌和神经母细胞瘤诊断及评价脑损伤程度及治疗效果。 　　1.3 微管相关蛋白 　　2微管相关蛋白2(microtubule associated protein-2，MAP-2)是一种热稳定的磷蛋白，属于结构性微管相关蛋白家族，主要在中枢神经系统神经元胞体和树突表达。MAP-2 与微管连接促进微管的稳定，可能参与神经元发育、结构稳定、突起形成和突触可塑性调节。 　　MAP-2 主要存在于神经元胞体和树突，是脑内最丰富的蛋白之一。MAP-2b 存在于神经系统发育的整个时期，而MAP-2a 是成年特异性蛋白，在大鼠出生后2 周才开始表达。MAP-2c 在神经系统发育早期表达，成年后消失，但在某些部位如视网膜和嗅球在成年后仍然表达，可能与这些部位成年后神经元生长和可塑性能力有关。MAP-2d 在大鼠生后5 d 才能检测到，主要在成年神经元胞体表达。而MAP-2e 短暂地表达在髓鞘化和多发性硬化症损害髓鞘再生时的少突胶质细胞。 　　1.4 Tau蛋白 　　Tau 蛋白(tau proteins)是含量最高的微管相关蛋白。正常脑中Tau 蛋白的细胞功能是与微管蛋白结合促进其聚合形成微管;与形成的微管结合，维持微管稳定性，降低微管蛋白分子的解离，并诱导微管成束。Tau 蛋白基因位于17 染色体长臂。正常人中由于Tau 蛋白mRNA 剪辑方式不同，可表达出6种同功异构体。Tau 蛋白的多种蛋白异构体是由单个基因，即人类基因组中为微管相关蛋白tau(microtubule-associated protein tau，MAPT)mRNA 的选择性剪接而形成的。1975 年，它们由MarcKirschner 在普林斯顿大学的实验室中发现。Tau蛋白通过异构和磷酸化控制微管的稳定性。Tau 蛋白在神经元中含量非常丰富，而少见于其它细胞，但在中枢神经系统的星形