不同刺激频率和强度对蟾蜍腓肠肌收缩的影.docVIP

不同剌激强度和频率对蟾蜍腓肠肌收缩的影响 【实验目的】1．掌握蟾蜍坐骨神经腓肠肌标本的制备方法。2．观察不同刺激强度和频率刺激对肌肉收缩的影响 【摘要】 目的：掌握制备具有正常兴奋收缩功能的蛙类坐骨神经腓肠肌标本基本操作技术；并观察在刺激时间、强度变化率恒定的条件下，不同强度和频率的电刺激对肌肉收缩的影响。 方法：使用生物信号采集处理系统，通过设定频率对蟾蜍坐骨神经进行刺激，记录分析数据结果。【关键词】 刺激；；腓肠肌健康蟾蜍只蛙类手术器械一套（粗剪刀一把、组织剪一把、眼科剪一把、镊子一把、探针一根、玻璃分针2把、蛙钉4个、培养皿1个，蛙板一个、滴管一个、棉线若干），张力换能器，肌槽，刺激电极，铁架台，微机生物信号采集处理系统，任氏剂蛙类坐骨神经—腓肠肌标本的制备捣毁蟾蜍脑脊髓：取蟾蜍一只，用自来水冲洗干净。左手握蛙，用食指下压头部前端，拇指按压背部，使头前俯。中指与无名指夹其前肢，无名指与小指夹其后肢，使整个躯干做最大屈曲。把探针自枕骨大孔处垂直刺入，到达椎管，即将探针改变方向刺入颅腔，向各侧不断搅动，彻底捣毁脑组织；再将探针原路退出，刺向尾侧捻动探针使其逐渐刺入整个椎管内，完全彻底捣毁脊髓。脊髓破坏完全的标志是：下颌呼吸运动消失，反射消失，四肢松软。 剪除躯干上部和内脏，去皮，制备下肢标本： 用粗剪刀在骶髂关节前1厘米处剪断脊柱，握住蟾蜍下肢，沿躯干两侧（避开坐骨神经）剪开腹壁。此时躯干上部及内脏即全部下垂。剪除全部躯干及内脏组织。剪去肛周皮肤；用圆头镊子夹住脊柱，注意不要碰到坐骨神经，捏住皮肤边缘，逐步向下牵拉剥离皮肤。将全部皮肤剥除后，把标本置于培养皿中任氏液。 3）然后洗净双手和用过的全部手术器械。 4 ）分离两： 避开坐骨神经，用粗剪刀从背侧剪去骶骨，然后沿中线将脊柱剪成左右两半，再从耻骨联合中央剪开，将已分离的标本浸入培养皿中任氏液。 5） 取出一下肢，用蛙钉固定于蛙板上，固定时要注意，坐骨神经和腓肠肌朝上。先用玻璃分针沿脊柱侧游离坐骨神经腹腔部，然后循股二头肌和半膜肌之间的坐骨神经沟，纵向分离暴露坐骨神经之大腿部分直至腘窝，在分离过程中，，但要注意不要用金属器械碰触神经，也不要对神经过度牵拉。实验期间应不断滴加任氏液使神经保持湿润。 6 )用玻璃分针游离腓肠肌，并在下面穿线，在跟腱处打结。在结扎线的下方剪断跟腱，在膝关节处把除腓肠肌外的小腿其他部分剪除。注意保持完整的腓肠肌。 7)用棉线在靠近脊柱的位置结扎坐骨神经，并在结扎线的上方剪断神经，用眼科剪剪断坐骨神经的全部分支。从腘窝处开始剪掉大腿所有的肉，尽量把股骨刮干净，在膝关节上至少1cm处剪去上段股骨。2. 实验装置与仪器连接：1.将标本股骨残端固定在肌槽上的小孔内2.将结扎腓肠肌肌腱的棉线与张力换能器连接，调节棉线的松紧，要与桌面垂直3.将神经置于肌槽的刺激电极上，用任氏剂保持标本湿润4.刺激电极插入微机上的刺激输入孔））打开电脑，进入生物信号采集处理系统，在菜单栏选择“实验项目”--------》“神经肌肉”-------》“刺激强度与反应的关系实验模块”点击开始，调节刺激参数先给神经一个最小单刺激后，观察肌肉是否收缩，如果没有收缩就渐加刺激强度，直到肌肉开始收缩，不断增加刺激强度，观察肌肉收缩和刺激强度的关系，找到最适刺激强度把刺激强度调节到最适刺激强度，调节刺激频率，观察刺激频率对骨骼肌收缩的影响，并找到发生不完全强直收缩的最小刺激频率和发生完全强直收缩的最小刺激频率。分别记录波形图，打印。1具有正常兴奋收缩功能的蟾蜍坐骨神经–腓肠肌标本制备成功 2不同频率刺激对肌肉收缩的影响：频率间隔为3HZ，延时为2s，强度0.08v，延时20，宽波5时的张力变化（见图）可见单收缩 不完全强直收缩完全强直收缩 【讨论 1．阈下刺激不引起肌肉发生收缩反应。当刺激强度逐渐增强时，可引起少数肌纤维发生收缩反应，这种最小收缩反应的有效强度为阈强度也叫最小刺激强度。随着刺激强度的加大，参加收缩反应的肌纤维数量增多，收缩力量也加大，此时的刺激为阈上刺激。阈上刺激强度增加到某一值时，再继续增强刺激强度，肌肉收缩反应不再继续增加。引起肌肉最大收缩的最小刺激强度称为最适刺激强度实验028V是最适刺激强度。一个阈上强度的刺激，发生一次动作电位，随后出现一次收缩和舒张，称为单收缩；单收缩的过程可分为3个时期：潜伏期、收缩期和舒张期。两个相同强度的阈上刺激，相继作用与神经－肌肉标本，如果刺激间隔大于单收缩的时程，肌肉则出现两个分离的单收缩；当同等强度的连续阈上刺激作用与标本时，则出现多个收缩反应的叠加，此为强直收缩。当后一收缩发生在前一收缩的舒张期时，称为不完全强直收缩；后一收缩发生在前一收缩的收缩期时，各自的收缩则完全融合，肌肉出现持续的收缩状态，此为完全强直收缩肌浆网。产