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2017届高考生物第一轮知识点复习导学案22.doc
第1讲 基因工程
[最新考纲]
1.基因工程的诞生(Ⅰ) 2.基因工程的原理及技术(Ⅱ) 3.基因工程的应用(Ⅱ) 4.蛋白质工程(Ⅰ)
考点一 基因工程的操作工具
1.基因工程的概念理解
(1)供体:提供目的基因。(2)操作环境:体外。(3)操作水平:分子水平。(4)原理:基因重组。
(5)受体:表达目的基因。
(6)本质:目的基因在受体体内表达。
(7)优点
①与杂交育种相比:克服了远缘杂交不亲和的障碍。
②与诱变育种相比:定向改造生物遗传性状。
2.DNA重组技术的基本工具
(1)限制性核酸内切酶(简称:限制酶)
①来源:主要是从原核生物中分离纯化出来的。
②作用:识别特定的核苷酸序列并切开相应两个核苷酸之间的磷酸二酯键。
③结果:产生黏性末端或平末端。
(2)DNA连接酶
①种类:按来源可分为E·coli DNA连接酶和T4DNA连接酶。
②作用:在两个核苷酸之间形成磷酸二酯键以连接两段DNA片段。
(3)载体
①种类:质粒、λ噬菌体的衍生物、动植物病毒等。
②质粒特点
[深度思考]
(1)限制酶与DNA连接酶的关系。
提示:①限制酶和DNA连接酶的作用部位都是磷酸二酯键。
②限制酶不切割自身DNA的原因:原核生物中不存在该酶的识别序列或识别序列已经被修饰。
(2)载体所具备条件的目的性。
提示:
条件 目的性 稳定并能复制 目的基因稳定存在且数量可扩大 有一个至多个限制酶切割位点 可携带多个或多种外源基因 具有特殊的标记基因 便于重组DNA的鉴定和选择 (3)几种酶的比较。
提示:
比较项目 限制酶 DNA连接酶 DNA聚合酶 解旋酶 作用底物 DNA分子 DNA分子片段 脱氧核苷酸 DNA分子 作用部位 磷酸二酯键 磷酸二酯键 磷酸二酯键 碱基对间的氢键 模板 不需要 不需要 需要 不需要 作用结果 形成黏性末端或平末端 形成重组DNA分子 形成新的DNA分子 形成单链DNA分子
题组一 考点诊断
(1)切割质粒的限制性核酸内切酶均特异性地识别6个核苷酸序列。(2014·高考江苏卷)( )
(2)载体质粒通常采用抗生素合成基因作为筛选标记基因。(2014·高考江苏卷)( )
(3)限制酶只能用于切割目的基因。( )
(4)DNA连接酶能将两碱基间通过形成氢键连接起来。( )
(5)E·coli DNA连接酶既可连接平末端,又可连接黏性末端。( )
(6)质粒是小型环状DNA分子,是基因工程常用的载体。( )
答案:(1)(×) (2)(×) (3)(×) (4)(×) (5)(×) (6)(√)
题组二 基因工程操作工具的分析
1.若要利用某目的基因(见图甲)和P1噬菌体载体(见图乙)构建重组DNA(见图丙),限制性核酸内切酶的酶切位点分别是BglⅡ(A↓GATCT)、EcoRⅠ(G↓AATTC)和Sau3AⅠ(↓GATC)。下列分析合理的是( )
A.用EcoRⅠ切割目的基因和P1噬菌体载体
B.用BglⅡ和EcoRⅠ切割目的基因和P1噬菌体载体
C.用BglⅡ和Sau3AⅠ切割目的基因和P1噬菌体载体
D.用EcoRⅠ和Sau3AⅠ切割目的基因和P1噬菌体载体
解析:选D。解答本题的关键是要看清切割后目的基因插入的方向,只有用EcoRⅠ和Sau3AⅠ切割目的基因和P1噬菌体载体,构建的重组DNA中RNA聚合酶在插入的目的基因上的移动方向才一定与图丙相同。
2.下列关于载体的叙述中,错误的是( )
A.载体与目的基因结合后,实质上就是一个重组DNA分子
B.对某种限制酶而言,载体最好只有一个切点,但还要有其他多种酶的切点
C.目前常用的载体有质粒、λ噬菌体的衍生物和动植物病毒
D.载体具有某些标记基因,便于对其进行切割
解析:选D。标记基因的作用是便于筛选出重组载体,不是便于对其切割。
3.如图为DNA分子在不同酶的作用下所发生的变化,图中依次表示限制酶、DNA聚合酶、DNA连接酶、解旋酶作用的正确顺序是( )
A.①②③④ B.①②④③
C.①④②③ D.①④③②
解析:选C。限制酶可在特定位点对DNA分子进行切割;DNA聚合酶在DNA分子复制时将脱氧核苷酸连接成脱氧核苷酸链;DNA连接酶可将限制酶切开的磷酸二酯键连接在一起;解旋酶的作用是将DNA双链解开螺旋,为复制或转录提供模板。
1.限制酶是一类酶,而不是一种酶。2.限制酶切割位点所处的位置必须是在所需的标记基因之外,这样才能保证标记基因的完整性,有利于对目的基因的检测。3.为使目的基因与载体形成相同的DNA片段末端连接,通常使用同一种限制酶将二者切割,但如果不同的限制酶切割DNA分子所产生的末端也存在互补关系时,则两末端也可连接。考点二 基因工程的操作过程及其应用
1.基因工程的操作程序
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