感染性疾病的分子诊断-幻灯片.pptVIP

基因病概念 1975年，Dulbecco 提出：人类的DNA序列是人类的真谛，包括癌症在内的人类疾病的发生都与基因直接或间接有关 1978年，Susumu Tinegawa：从人类所有的疾病都与基因受损有关的角度出发，提出了人类疾病新概念——基因病（genic disease） 中国：引起死亡的主要疾病 基因病的分子诊断 诊断分子（标志物） 核酸 蛋白质 多糖类 代谢物（生物小分子） 激素 代谢产物 基因病的分子诊断技术 基于核酸的分子诊断技术 bDNA PCR PCR类型：巢式PCR，等温PCR，…… 定性PCR PCR产物 ＋ RE酶切 → 电泳 PCR产物 ＋ RE酶切 → 杂交 定量PCR FQ-PCR（real-time PCR） 印迹：Southern/Northern blot Chip：micro-array 测序技术（sequencing） 支链DNA技术（branched DNA, bDNA） bDNA技术为一种核酸探针杂交标记信号放大技术 特点： 不经过呈指数增长的扩增过程，放大倍数确定，不利因素少，因此稳定性、重复性高，结果准确。 操作简便：只需将待测病毒裂解释放出核酸，并将其变性为单链，即可进行检测，不需事先纯化 缺点： 就是放大倍数少、敏感性低、检测范围窄，不适用于低水平检测。 第一代bDNA技术的检测范围3.5×105~5.7×107copies