《免疫学课件》22免疫学检测技术.pdfVIP

第二十二章 第二十二章 免疫学检测技术 免疫学检测技术 的基本原理 的基本原理 免疫学检测是应用免疫学理论设计 免疫学检测是应用免疫学理论设计 的一系列测定抗原、抗体、免疫细胞 的一系列测定抗原、抗体、免疫细胞 及其分泌的细胞因子的实验手段。 及其分泌的细胞因子的实验手段。 免疫学技术的应用极为广泛,可用于 免疫学技术的应用极为广泛,可用于 疾病的诊断、发病机制的研究、病情 疾病的诊断、发病机制的研究、病情 监测与疗效评价等。 监测与疗效评价等。 主要内容 主要内容 体外抗原抗体结合反应的特点及影 体外抗原抗体结合反应的特点及影 响因素 响因素 检测抗原和抗体的体外试验 检测抗原和抗体的体外试验 免疫细胞功能的检测 免疫细胞功能的检测 免疫学检测方法的应用 免疫学检测方法的应用 第1节 体外抗原抗体结合反应 第1节 体外抗原抗体结合反应 的特点及影响因素 的特点及影响因素 一、抗原抗体反应的特点 一、抗原抗体反应的特点 1.高度特异性 1.高度特异性 抗原与抗体的特异结合反应，是基于抗原决定 抗原与抗体的特异结合反应，是基于抗原决定 基与抗体的抗原结合部位之间的结构互补性。 基与抗体的抗原结合部位之间的结构互补性。 一般一种Ag只能与其所诱生的Ab结合。依此， 一般一种Ag只能与其所诱生的Ab结合。依此， 可用已知Ag检测相应Ab；或用已知Ab检测相应Ag。 可用已知Ag检测相应Ab；或用已知Ab检测相应Ag。 但如两种抗原具有相同或相似的抗原表位，则其 但如两种抗原具有相同或相似的抗原表位，则其 中一种抗原诱导机体产生的抗体可与另一种抗原 中一种抗原诱导机体产生的抗体可与另一种抗原 发生交叉结合。 发生交叉结合。 两种不同抗原如具有相同表位则可发生交叉反应 表位1 表位3 A抗原 B抗原 表位2 表位1 免疫动物 血清：Ab1 、Ab2 + AgA 特异性反应 + AgB 交叉反应 2.表面化学基团之间的可逆结合 2.表面化学基团之间的可逆结合 AgAb的结合，是分子表面的结合，为非共价键的 AgAb的结合，是分子表面的结合，为非共价键的 可逆结合。这种结合不如共价键结合稳定，在一定 可逆结合。这种结合不如共价键结合稳定，在一定 条件下，结合的AgAb复合物可以解离，其解离难度 条件下，结合的AgAb复合物可以解离，其解离难度 取决于两个方面:一是Ag与Ab的亲和力 （affinity ） 取决于两个方面:一是Ag与Ab的亲和力 （affinity ） 有关,亲和力指Ab分子上一个抗原结合部位与相应抗 有关,亲和力指Ab分子上一个抗原结合部位与相应抗 原决定基之间的结合强度,亲和力越高,越难解离,反 原决定基之间的结合强度,亲和力越高,越难解离,反 之越易解离.二是抗原抗体反应的环境条件,如温度、 之越易解离.二是抗原抗体反应的环境条件,如温度、 酸碱度、离子强度等. 酸碱度、离子强度等. 3.适宜的抗原抗体比例和浓度 3.适宜的抗原抗体比例和浓度 天然Ag分子表面含多种/多个Ag表位，可与多 天然Ag分子表面含多种/多个Ag表位，可与多 个Ab分子结合；Ab分子若为单体Ig，则有两个 个Ab分子结合；Ab分子若为单体Ig，则有两个