王跃平技术分析.pptx

时间分辨荧光质量控制及常见影响因素分析 大同市第五医院检验科---王跃平 时间分辨荧光检测原理 时间分辨荧光也称解离增强荧光免疫分析时间分辨荧光免疫分析仪，是以采用稀土离子标记抗原或抗体、利用发光信号的强弱可对待分析物进行定量的检测，从而换算出超微量活性物质含量。其灵敏度可以达到10-18mol/孔。该分析设备结构简单，操作方便，动态测量范围大，灵敏度高，检测速度快，具有较高的稳定性和重显性。 时间分辨荧光技术给临床检测带来的先进性 1.彻底消除了放射性危害 2.无半衰期限制，试剂稳定性和有效期大大延长 3.容易实现连续、动态、重复测定 4.分离特异性及非特异性荧光,零背景,高特异性 5.操作简单，反应速度快，容易实现自动化 6.灵敏度高、线性范围宽、重复性好 检测技术整体性能比较 技术类型 标记、反应体系 主要优点 化 学 发 光 酶促 过氧化物酶、鲁米诺、氧化剂、增强剂等 测量方式简单（速率法）成本较低、灵敏度较高 螺旋金刚烷环氧化物、碱性磷酸酶 测量方式简单（速率法）灵敏度较高 非酶促 吖啶酯、过氧化氢 灵敏度较高 时间分辨荧光 铕（Eu）、镝(Dy)、钐（Sm）、铽（Tb）、等络合物脉冲光源激发 零本底、灵敏度高 线性范围宽 试剂有效期长试剂价格 标准曲线稳定性好 自动化高 非开放性试剂系统、 试剂价格过高。 电化学发光 钌(Ru)的络合物脉冲电场激发 正常值参考及灰色区域的存在 如果测定结果处于灰色区域（约在正常值上下限以内20%）内，则需要进一步追踪检查。 由于个体差异或不明干扰因素的存在，总有少数病例的检测结果与其临床不符 不同实验方法， 或同一方法的不同厂家产品之间， 其测定结果和临床正常值都会有所差异 不同实验室环境和不同检测操作人， 其测定结果和临床正常值也会有所不同 待测物质的降解 及其与血清蛋白结合状态的改变， 某些化验项目的检测结果往往受 标本存放时间及其贮存条件的影响 在厂家提供的正常参考值基础上 建立自己的正常参考系统 及时采样、送检， 实验室及时完成化验， 严格按照试剂盒说明书要求存放 及时采样、送检， 实验室及时完成化验， 严格按照试剂盒说明书要求存放 时间分辩免疫分析结果干扰因素 温度 稀土离子 标记差异 时间 PH值 增强液 污染杂质 残留液 结果与临床不符的原因 原因 解决 操作失误、 仪器故障、 试剂失活等因素 排除这些因素后 重复测定或重复送样 某些试剂 往往存在前滞效应 用同试剂盒的校准品A 稀释后再重新测定 药物以及其它 基础疾病的干扰 及时与临床沟通 结合说明书综合判断 检验技师必须牢记 检验技师给临床所提供的一切服务仅限于保⑴、证检验结果准确性 ⑵对该检验项目或其检验结果普遍意义的解释（向临床大夫乃至患者的咨询制度）不要试图替临床大夫为某一具体病例作出最终诊断 免疫检测分析质量控制 目的： 同其他专业一样，保证免疫检验质量，使其具有较高的重复性、准确性和各试验之间的结果可比性。原则及方法与其它专业质控类似。 。 内容： 免疫检验的标准化 　　免疫检验结果可比性很差，原因一是实验方法不统一，二是缺少用于参考比较的标准试剂，标准化迫在眉睫。 1 、方法标准化 2 、试剂标准化 1 、方法标准化 （１）实验方法分类 ①决定性方法 准确度高，系统误差小，测值接近真值。 用途：标准品检测；参考方法评价 ( 一般不用于常规工作 ) ②参考方法 被决定性方法证实干扰因素少，测量结果可靠。 用途：鉴定常规方法；质控品定值 ( 有条件实验室可用于常规工作 ) ③常规方法 有足够的精密度、准确性、特异性和适当分析范围。 用途：经方法评估和学术组织认可后推荐为常规方法。 例如： HBsAg 定量 决定性方法——紫外分光光度计测定蛋白 参考方法——高标记率固相放免 常规方法——酶标 （２）实验方法选择原则 ①实用性：速度快、标本用量少、操作简便、安全可行。 ②可信性：精密度、准确度、敏感性、特异性均达到要求。 （３）方法的评估 ①敏感性 ②特异性 ③诊断指数 ④诊断效率 ⑤阳性预测值 ⑥阴性预测值 　 2 、试剂标准化 （１）分级 ① WHO 国际标准品 ② WHO 国际参考品 ③国家标准品 按国际标准品复制的标准品，效力单位与①严格一致。 ④研究室或厂家标准品 暂时用于工作的标准品，自行效价，但有国际标准品后，必须标化。 ⑤免疫学质控标准品和参考品 一般用国际标准品或国际参考品标化的用于质控的物质。 （２）免疫常用国际标准品和参考品 免疫学检验质控常用国际标准品和参考品 三、常用免疫质控 1 、质控一般要求 （１）标本收集及处理 每种标本有一定收集要求，应与临床医生、