讨论拐枣多糖对糖尿病小鼠血糖血脂的影响.docVIP

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讨论拐枣多糖对糖尿病小鼠血糖血脂的影响

讨论拐枣多糖对糖尿病小鼠血糖血脂的影响   糖尿病(Diabetes mellitus,DM)及其并发症已成为继心脑血管疾病、肿瘤之后严重危害人类健康的第三大常见病,据世界卫生组织(WHO)报告,全世界目前约有1.5 亿DM 患者,预测2025 年将上升到3亿,近年糖尿病以及多种并发病的发生率越来越高,对糖尿病的研究也随着成为研究热点。糖尿病慢性并发症的发生和发展与整体血糖水平的升高有密切的关系,同时糖尿病长时间的高糖环境会引起糖脂代谢的紊乱引起脏器病变引起并发症。血液中糖化血红蛋白(HbAlc)与血糖浓度成正比,所以检测血中HbAlc 水平可以直观的反映出血糖水平,更好地监测机体糖代谢的情况[4]。国外有学者研究证实了HbA1c是诊断血糖水平的重要指标,而且HbA1c 与空腹血糖(FBG)、甘油三酯(TG)低密度脂蛋白(LDL)呈正相关。在控制血糖水平的同时,有效调节血脂代谢紊乱对治疗糖尿病及其并发症有重要意义。植物多糖在自然界中广泛存在,具有降血糖、提高免疫力、防止心肌缺血等复杂的生物活性与功能,主要能促进胰岛素分泌,提高血浆胰岛素水平,抑制糖异生途径和调控糖原的合成、分解及促进血糖利用。目前,市场上治疗糖尿病的药物主要是化学合成药,虽然短期疗效显著,但常伴有不同程度的副作用,如心血管疾病、过敏反应等。   拐枣(Hovenia acerba Lindl.) 俗称万寿果属鼠李科枳椇属落叶乔木,因其果梗肉质膨大扭曲,肉质肥厚形似鸡爪,味甘甜如枣,故名拐枣。营养丰富,清凉利尿,解酒醉不醒,可治风湿,有清热利尿、止渴降火和解毒之功效,果梗性甘平有健胃补血的作用,主治头风、润五脏、利大小便,在甘肃省陇南市徽成盆地广为栽培,产量很高。拐枣多糖(Hovenia acerbaLindl. Polysaccharides,HAP)系其主要有效成分,可治腋下狐臭和痔疮,同其它药用植物多糖一样复杂的生物活性与功能,而拐枣多糖在降血糖、血脂方面的研究较少。为此,本文采用ALX 诱导建立糖尿病小鼠模型来研究拐枣多糖作用于化学性糖尿病小鼠模型,观察拐枣多糖对糖尿病小鼠的降血糖和降血脂作用效果,来开发无毒无副作用的降糖替代药物,对拐枣多糖综合开发提供实验技术,促进拐枣产业经济的发展具有重大意义。   1 材料与方法   1.1 材料与仪器   1.1.1 实验材料与动物   拐枣采自甘肃省陇南市成县支旗镇梁旗村;实验动物和饲料均购自兰州大学医学院实验动物中心饲料。   1.1.2 实验药品   四氧嘧啶,Sigma 公司;盐酸二甲双胍片,上海医药(集团)有限公司信谊制药总厂生产;格列苯脲片,上海信谊药厂有限公司生产;血糖试纸,爱奥乐医疗器械(深圳)有限公司;普鲁卡因肾上腺素注射液,远大医药(中国)有限公司生产。   1.1.3 主要仪器RE52AA   旋转蒸发仪,上海亚荣生化仪器厂;HH-6数显恒温水浴锅,上海千载科技有限公司;TGL-16G高速台式离心机,上海安亭科学仪器厂;UV759 紫外-可见分光光度计,上海精密科学仪器有限公司;TDL-5000B 型低速冷冻大容量离心机,上海安亭科学仪器厂;LGJ-18 型冷冻干燥机,北京四环科学仪器厂;全自动生化分析仪AU5800,贝克曼库尔特有限公司;全自动血糖检测仪,爱奥乐医疗器械(深圳)有限公司;LC-6A 高压液相色谱仪(配有 RI-10A 示差折光检测器、7725i 手动进样器、CTO-10AS 柱温箱、CBM-20A 在线控制器和LC-solution 分析软件),日本岛津公司;TSK-Gel SW3000 和TSK-Gel SW4000 色谱柱,日本 Tosoh 公司等。   1.2 实验方法   1.2.1 拐枣多糖的提取   将拐枣在 50 ℃ 烘干后将其粉碎,用无水乙醇回流脱脂,50 ℃烘干,取100 g 然后加入一定量的1000ml 蒸馏水,在40 ℃温度下溶解2 h 后,真空抽滤所得上清液经过减压浓缩得浓缩液,与 Sevag 试剂(氯仿:正丁醇体积比4:1)按体积比5:1 混合,振荡,离心弃去变性蛋白,重复4 次。合并水层,用 95% 的乙醇沉淀(体积比3:1),5000 r/min 离心10 min,沉淀物溶于40 ℃热水中,搅拌状态下慢慢加入斐林试剂,析出铜络合物,静置1 h,倾出上清液,用水洗涤3 次,离心分离得络合物,向络合物中加4 ℃蒸馏水,再滴加 0.5 mol/L HCl 使之全部溶解,用 95% 的乙醇沉淀(体积比3:1),离心,所得絮状物分别用乙醇、丙酮、乙醚洗涤,冷冻干燥得洁白拐枣多糖粉末。   1.2.2 拐枣多糖对正常小鼠血糖水平的影响   取 KM 小鼠50 只,随机分为5 组。按250 mg/k

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