实验一光学显微镜的使用和动物细胞的形态结构研究报告.ppt

光学显微镜的结构和使用动物细胞的形态结构 生命科学技术学院 细胞工程教研室 许重洁 xcj029@163.com 光学显微镜和它拍摄的图片 熟悉光学显微镜基本结构和用途； 掌握显微镜维护的基本知识； 初步掌握低倍镜、高倍镜使用方法； 掌握标本制备的方法 实验材料与用品 材料：生物玻片标本 用品：普通光学显微镜、相差显微镜、暗视野显微镜、荧光显微镜、倒置显微镜、擦镜纸、乙醚酒精、香柏油。 一、显微镜的使用 1.显微镜的结构 机械部分 镜座 镜柱 镜臂 镜筒 物镜转换器 标本推进器 载物台 标本推进器螺旋 调焦螺旋 光学部分 目镜：10×（放大倍数） 物镜： 红，4× 黄，10× 蓝，40× 白，100× 目镜 物镜 10/0.25: 放大倍数/数值孔径（分辨率） 160/0.17:物镜长度/允许盖玻片厚度 照明部分 灯光：光源 光圈（光阑）：控制光束大小 调节亮度 光圈 灯光 聚光镜 聚光镜：将平行光汇聚在物镜， 可得均匀亮度 升高与降低聚光镜 如何调节观察视野的明暗度？ 2.显微镜的使用方法 低倍镜的使用： （1）取镜：右手握镜臂左手托镜座， （2）置镜：实验台正位偏左，距桌边5cm； （3）对光：打开光源，调整粗准焦螺旋，使载物台与物镜分开，转动物镜转换器将低倍镜对准通光孔，确认聚光镜上升、光圈打开，向目镜观察，看到明亮视野； （3）装玻片标本：移开物镜，将玻片标本放于载物台，标本推进器固定，旋转标本推进器旋钮，调整标本目标对准聚光镜正上方； （4）调焦：低倍镜对准标本目标，侧面观察并调节粗准焦螺旋，至标本与物镜相距0.5cm处停止，再观察目镜并调整粗准焦螺旋转动载物台下降，直至物像清晰，可用细准焦螺旋调整。 高倍镜的使用： （1）先在低倍镜下找到目标物，移动至视野中央； （2）不动调焦螺旋，从侧面观察物镜，转动物镜转换器，切换到高倍镜下，使高倍镜对准通光孔； （3）从目镜下观察，调整视野亮度，转动细准焦螺旋直至出现清晰的物像； 二、临时制片 1.人口腔粘膜上皮细胞（涂片） 漱口→擦片（载玻片盖玻片各一张）→取材→ 涂片（单方向一次性） →甲苯胺蓝染色（1min） →盖片→镜检 注意事项： 取材注意力度 单方向一次性涂片 盖片应避免气泡产生 口腔粘膜上皮细胞 人口腔上皮细胞 扁平上皮细胞 生物绘图 1.用铅笔（HB/2H）硬度稍高 2.选择典型结构绘图，特征、比例等 3.线、点绘图：线绘制轮廓，要平滑；点的疏密表示颜色深浅，点要圆，垂直点点。 4.标注结构，文字标右侧 5.图名称标在图的正下方，标注放大倍数 6.无需边框 生物绘图注意事项 1.表现形式只有点和线，不能涂阴影。 2.对各个部位要加以说明。 3.引线要平行，前端可以不对齐，后端 一定要对齐。 4.绘图用普通铅笔，不能用彩色铅笔。 2.蛙血细胞（推片） 擦片（载玻片两张）→牛蛙处死（双毁髓）→解剖→心脏采血→滴片→推片→晾干→镜检 重点： 大小、 位置、角度、速度 双毁髓法 以左手握住蛙，背部向上，用食指压住其头部，使其略向下弯，将毁髓针自枕骨大孔插入，先左右横断脊髓，再向前伸入颅腔捣毁脑，然后再将毁髓针撤回至枕骨大孔，反向插入脊椎管破坏脊髓，检查蛙四肢肌肉完全松弛后处死成功。 细胞膜 细胞质 细胞核 蛙红细胞示意图 3.脊髓前角运动神经细胞的制备和观察 取脊柱 剪去多余的肌肉和结缔组织 掰开脊柱， 剪下一小段脊髓 压片 甲苯胺蓝染色5分钟 盖片 吸去多余染液 观察 重点：压片 量、力量均匀、不可滑动、云雾状 星状细胞 离体培养的新生老鼠脊髓神经细胞(HE染色) 作业 1.绘制人口腔上皮细胞、蛙血细胞（各选1-3个细胞），并标注。 2.显微镜使用的注意事项（要求条目细致） 地点：院系楼西门一楼细胞工程教研室