第10章酶促反应动力学.ppt

概念 　　酶促反应动力学（Kinetics of enzyme-catalyzed reactions）：是研究酶促反应的速率以及影响此速率的各种因素的科学。 一、化学动力学基础 化学反应的两个基本问题： 反应进行的方向、可能性和限度 反应进行的速率和反应机制 （一）反应速率及其测定 ——以单位时间内反应物或生成物 浓度的改变来表示。 单分子反应 v = kc 双分子反应 v = kc1c2 c 、c1、c2 ：反应物浓度（mol/l） k：比例常数/反应速率常数 2.反应级数 能以v = kc表示，为一级反应； 能以v = kc1c2表示，则为二级反应； v 与反应物浓度无关，则为零级反应。 （三）各级反应的特征 1.一级反应： 反应速率与反应物浓度的一次方成正比。 v = kc 具体推导过程 　　　稳态：指反应进行一段时间后，系统的复合物ＥＳ浓度，由零逐渐增加到一定数值，在一定时间内，尽管底物浓度和产物浓度不断地变化，复合物ＥＳ也在不断地生成和分解，但当反应系统中ＥＳ的生成速率和ＥＳ的分解速率相等时，络合物ＥＳ浓度保持不变的这种反应状态就称为稳态。 在稳态下，ES的生成速率d[ES]/dt=k1([E]-[ES]) ·[S] …………………… (1) 即得出： k1([E]-[ES]) ·[S] =k2[ES]+K3[ES] 移项可得：([E]-[ES]) ·[S]/[ES]=(K2+K3)/K1…(3) a.当[S]很小时 V=V[S]/Km 一级反应 Km=? Km = [S] ①Km是酶的特性常数： 与pH 、温度、离子强度、酶及底物种类有关，与酶浓度无关，可以鉴定酶。 酶促反应按底物分子数的分类 最适pH因酶而异，多数酶在7.0左右 一些酶的最适pH pH对酶活力的影响的主要原因 （1）极端的pH值即过酸或过碱引起酶蛋白变性，因而酶活力丧失。 （2）pH的改变影响酶分子上酸性和碱性氨基酸残基的侧链基团的解离状态。 　　如果基团处于酶的活性中心，直接影响酶与底物的结合和进一步的催化反应； 　　如果处在中心之外，则影响酶的三维空间结构，从而影响酶活性。 （3）pH值改变也影响底物的解离状态，或者底物不能与酶结合，或者结合后不能生成产物。 研究酶抑制作用的意义 是用于研究酶的结构与功能、酶的催化机制以及阐明代谢调控途径的基本手段； 可以为医药设计新药物和为农业生产新农药提供理论依据。 （一）抑制程度的表示方法 1.相对活力分数（残余活力分数） 3.抑制分数 ——指被抑制而失去活力的分数 依据： 能否用透析、超滤等物理方法 除去抑制剂，使酶复活。 抑制作用可通过超滤、透析等方法除去。 原因：非共价键结合 （1）竞争性（Competitive)抑制 竞争性抑制的特点： ⑴ 竞争性抑制剂往往是酶的底物类似物或反应产物； ⑵ 抑制剂与酶的结合部位和底物与酶的结合部位相同； ⑶ 抑制剂浓度越大，则抑制作用越大；但增加底物浓度可使抑制程度减小； ⑷ 动力学参数：Km值增大，Vm值不变。 利用竞争性抑制是药物设计主要思路 磺胺类药抗菌机理： （与对氨基苯甲酸是结构类似物） 竞争性抑制细菌叶酸形成，抑制细菌繁殖 人通过食物直接补充叶酸，对人无毒害。 反竞争性抑制的特点： ⑴ 反竞争性抑制剂的化学结构不一定与底物的分子结构类似； ⑵ 抑制剂与底物可同时与酶的不同部位结合； ⑶ 必须有底物存在，抑制剂才能对酶产生抑制作用；抑制程度随底物浓度的增加而增加； ⑷ 动力学参数：Km减小，Vm降低。 不可逆抑制剂 青霉素的抗菌机理 　　青霉素是糖肽转肽酶的不可逆抑制剂。糖肽转肽酶是在细菌细胞壁合成期间催化肽聚糖链的交联的。青霉素通过干扰肽聚糖链之间的肽交联桥的形成，使细菌失去抗渗透能力，因此细菌停止死亡。 竞争性：I与S与酶活性中心结合机会均等 V下降发生抑制 Km不变 亲和力不受影响 Vmax减小 部分酶始终失活 抑制剂I和底物S对游离酶E的结合有竞争作用，互相排斥，已结合底物的ES复合体，不能再结合I。同样已结合抑制剂的EI复合体，不能再结合S。 I： 抑制剂（ inhibitor） 【举例】 丙二酸与琥珀酸竞争琥珀酸脱氢酶 琥珀酸 琥珀酸脱氢酶 FAD FADH2 延胡索酸 琥珀酸 竞争性抑制 磺胺药物的抑菌作用 人体作为微生物的宿主，可以从食物中摄取四氢叶酸，因此磺胺类药物不影响正常叶酸代谢，而微生物靠自身合成四氢叶酸，一旦叶酸代谢受阻，生命不能继续，因此微