第11章RNA的生物合成.pptVIP

依赖Rho 因子的转录终止 非依赖Rho因子的转录终止 ρ因子是由相同亚基组成的六聚体蛋白质，亚基分子量46kD。 ρ因子能结合RNA，又以对poly C的结合力最强。 ρ因子还有ATP酶活性和解螺旋酶(helicase)的活性。 目前认为，ρ因子终止转录的作用是：与RNA转录产物结合，结合后ρ因子和RNA聚合酶都可发生构象变化，从而使RNA聚合酶停顿，解螺旋酶的活性使DNA/RNA杂化双链拆离，利于产物从转录复合物中释放 。 * * RNA的生物合成 RNA Biosynthesis ( Transcription ) 转录 (transcription) 是生物体以DNA为模板合成RNA的过程 。 转录 RNA DNA 参与转录的物质： 原料: NTP (ATP, UTP, GTP, CTP) 模板: DNA 酶 : RNA聚合酶(RNA polymerase, RNA-pol) 其他蛋白质因子 5′···GCAGTACATGTC ···3′ 3′··· c g t g a t g t a c a g ···5′ 5′···GCAGUACAUGUC ···3′ N······Ala · Val · His · Val ······C 编码链 模板链 mRNA 蛋白质 转录 翻译 DNA双链中按碱基配对规律能指引转录生成RNA的一股单链，称为模板链(template strand)，也称作有意义链或Watson链。相对的另一股单链是编码链(coding strand)，也称为反义链或Crick链。 RNA聚合酶 RNA聚合酶和DNA的特殊序列——启动子(promoter)结合后，就能启动RNA合成。 模板链 AACTGT ATATTA TTGACA TATAAT 3’ 5’ DNA 转录起始点 Pribnow盒子 启动子 ?35 ?10 +1 转录区 5’ 3’ RNA 转录起点 与新生RNA链第一个核甘酸相对应DNA链上的碱基。 编码链 TTGACA区/-35区：提供了RNA聚合酶全酶识别的信号 TATA区/-10区：酶的紧密结合位点（富含AT碱基，利于双链打开） 启动子：指能被RNA聚合酶识别、结合并启动基因转录的一段DNA序列。 原核生物的转录过程 The Process of Transcription in Prokaryote 2. DNA双链局部解开，形成开放转录复合体(open transcription complex) ； 1. RNA聚合酶全酶(?2????)与模板结合，形成闭合转录复合体(closed transcription complex) ； 3. 在RNA聚合酶作用下发生第一次聚合反应，形成转录起始复合物： RNApol (?2????) - DNA - pppGpN- OH 3? 转录起始复合物: 5?-pppG -OH + NTP ? 5?-pppGpN - OH 3? + ppi 转录过程： 4. ?亚基脱落，RNA–pol聚合酶核心酶变构，与模板结合松弛，沿着DNA模板前移； 5. 在核心酶作用下，NTP不断聚合，RNA链不断延长。 (NMP) n + NTP ?? (NMP) n+1 + PPi 转录空泡(transcription bubble)： RNA-pol （核心酶） ···· DNA ···· RNA 转录延长： 5? 3? DNA 原核生物转录过程中的羽毛状现象 核糖体 RNA RNA聚合酶 在同一DNA模板上，有多个转录同时在进行； 转录尚未完成，翻译已在进行。 这种形状说明： 原核生物转录终止分为依赖ρ(Rho)因子与非依赖ρ因子两大类 转录终止指RNA聚合酶在DNA模板上停顿下来不再前进，转录产物RNA链从转录复合物上脱落下来。 依据是否需要蛋白质因子的参与，原核生物转录终止分为： （一）依赖ρ因子的转录终止 ρ因子：