第一讲基因工程
拓展:质粒载体质粒是细菌拟核DNA外的环状DNA小分子,可在细菌间转移。质粒是常用的转基因载体。 病毒载体 病毒很适合用于基因治疗。病毒的蛋白质外壳内能容纳多达7 500个碱基的DNA片段。当病毒侵染宿主细胞并在细胞内增殖时,也将重组DNA带入到细胞中。病毒已经用于多次基因治疗的临床实验。这种方法存在的问题是宿主对病毒的免疫反应。 拓展:显微注射,DNA可以通过显微注射转入动物细胞中。下图所示的是目的基因的多份拷贝正通过玻璃微型吸管注射到受精卵中。转基因小鼠和家畜都是利用这种方法产生的,但是成功率很低;只有2%~3%的受精卵发育成转基因动物,在这些动物中只有一小部分表达了转入的基因。 基因枪法,这种方法是利用压缩气体产生的动力将包裹在金属颗粒表面的外源DNA打入生物组织中。常用的金属颗粒有金粉粒子或钨粉粒子。一些细胞能像表达自身基因一样表达导入的外源DNA。 1.“分子手术刀”——限制性核酸内切酶(限制酶),(1)存在:主要存在于原核生物中。 (2)特性:一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列,并且能在特定的切点上切割DNA分子。 (4)切割后末端的种类:DNA分子经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式——黏性末端和平末端(如图所示)。当限制酶在它识别序列的中轴线两侧将DNA的两条链分别切开时,产生的是黏性末端,而当限制酶在它识别序列的中轴线处切开时,产生的则是平末端。
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