第七章DNA重组技术.doc

第七章 DNA重组技术 不同来源的DNA分子，通过磷酸二酯键连接而重新组合的过程，称为DNA重组（DNA recombination） 。重组DNA技术（recombinant DNA technology）作为分子生物学的一项重要技术得到了迅速的发展。利用重组DNA技术对DNA分子进行剪切和重新连接，构成重组DNA分子，然后把它导入宿主细胞，进而扩增相关DNA片段，表达相关基因的产物，是进行基因功能研究的基本方法。克隆（clone）是指由一个细胞经过无性繁殖以后形成的子代群体。构建DNA重组体并导入宿主细胞建立无性繁殖体系，即DNA的分子克隆（molecular cloning）过程。因此，重组DNA技术又称为分子克隆技术或基因工程技术。 第一节 工具酶 一、限制性内切酶 限制性内切酶（restriction endonucleases，RE）是其中最重要的工具酶之一。它是一类核酸水解酶，能识别和切割双链DNA分子中的特定核苷酸序列。 命名原则 限制性内切酶大多从细菌中发现，根据来源进行命名，限制酶的第一个字母（大写，斜体）为宿主菌的属名，第二、第三个字母（小写，斜体）代表宿主菌的种名缩写，第四个字母（斜体）是株或型，最后的罗马数字表示同株内发现和分离的先后顺序。如从流感嗜血杆菌中分离到的几种限制性内切酶分别命名为HindⅠ、HindⅡ、HindⅢ等等。 分类 根据酶