第十一章－抗生素类药物的分析.pptVIP

Contents 四、含量测定： HPLC（盐酸四环素、盐酸金霉素） 微生物检定法 7.色谱法 8.光谱法 第三节 氨基糖苷类 三、 Test 1.链霉素中链霉素B（甘露糖链霉素）的检查 来源：发酵中产生 方法：TLC中的对照品法 3.庆大霉素C组分的测定 HPLC法 第三节 氨基糖苷类 色谱条件与系统适用性试验：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以水－冰醋酸－甲醇(25:5:70) 配制的0.02mol/L庚烷磺酸钠溶液为流动相（必要时调节甲醇的含量）；检测波长为330nm 。理论板数按C2组分峰计算应不低于2000。C2a 峰和C2峰的分离 度应符合要求。 测定法 取本品适量，精密称定，加水制成每1ml 中含0.65mg的溶液，精密量取4.0 ml，置10ml量瓶中，加异丙醇2ml与邻苯二醛试液1.6ml，用异丙醇稀释至刻度，摇匀，置60℃水浴中加热15分钟，冷却，滤过，取续滤液10μl 注入液相色谱仪，记录色谱图； 另取庆大霉素标准品，同法测定。C组分的保留时间依次为：C1、C1a、C2a、C2。量取C1、C1a、C2a、C2的峰面积。 C1应为25％～50％，C1a应为15％～40％，C2a＋C2应为20～50％ 。 第三节 氨基糖苷类 庆大霉素无紫外吸收，需进行衍生化处理后再进行HPLC测定。 λmax = 330nm 第三节 氨基糖苷类 4.硫酸盐测定——EDTA滴定 四、Assay 微生物检定法（硫酸庆大霉素、硫酸链霉素） HPLC法 第四节 四环素类 A B C D 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 由放线菌产生的广谱抗生素，金霉素、土霉素、四环素等， 一、结构与性质 第四节 四环素类 1）两性： -OH→酸性 N(CH3)2→碱性 Ca2+、Mg2+生成不溶性盐；Fe3+形成红色配合物； 　 Al3+形成黄色配合物 ； 与酸、碱均可成盐； 临床多用盐酸盐； 强酸或强碱中溶解度↑ 2）旋光性 3）UV和荧光 4）与金属离子络合(醇羟基、烯醇基) 弱酸性（pH2-6） A环C-4异构化 差向四环素 酸性（pH 2） C环脱水 脱水四环素 碱性 C环开环，形成内酯 异四环素 5）不稳定性 第四节 四环素类 A.差向异构化 蓝色荧光 淡黄→黑 第四节 四环素类 B.酸性脱水降解 λmax = 445nm λmax = 435nm D D D C B B C B C C.碱性脱水降解 第四节 四环素类 OH- 第四节 四环素类 二、Identification 1、HPLC 2、TLC (正相分配薄层色谱) EDTA→克服痕量金属造成的拖尾现象 3、IR 4、UV 5、显色法 浓硫酸（遇酸产生颜色P254） 三氯化铁 200nm 300nm 400nm TC 第四节 四环素类 三、Test 1.有关物质——HPLC 2.杂质吸光度——UV 268nm 355nm Analysis of antibiotics 第十四章抗生素类药物的分析 概 述 1 β-内酰胺类 2 氨基糖苷类 3 四环素类 4 第一节 概述 1.抗生素（antibiotics） 在低微浓度下即可对某些生物（病原微生物）的生命活动有特异抑制作用的化学物质的总称 2.分类 β–内酰胺类(青霉素类、头孢菌素类) 氨基糖苷类(链霉素、庆大霉素、依替米星) 四环素类(四环素、金霉素、土霉素) 大环内酯类(红霉素、螺旋霉素、麦迪霉素) 第一节 概述 3.来源 生物合成（发酵） 化学合成或半合成 4.特点 化学纯度较低 活性组分易发生变异 稳定性差 第一节 概述 5.抗生素质量分析——生物学法、物理化学法 鉴别：理化方法、微生物法 检查：水分、pH值、异常毒性、热原、细菌内毒素、降压物质等 含量/效价测定： 微生物法 ： 与临床疗效吻合,灵敏度高，结果直观，适用范围广；但操作复杂费时，误差大 理化方法：准确度与专属性较高, 且操作简便；但与临床疗效有偏差 第二节 β–内酰胺类 青霉素(苄青霉素) (penicillins) 氨苄西林 阿莫西林 第二节 β–内酰胺类 头孢氨苄 头孢拉定 头孢羟氨苄 第二节 β–内酰胺类 6-aminopenicillanic acid, 简称6-APA 青霉素类 7-aminocephalosporanic acid, 简称7-ACA 头孢菌素类 氢化噻唑环 氢化噻嗪环 ＊ ＊ ＊ ＊ 第二节 β–内酰胺类 一、结构与性质 1.酸性（羧基） pKa