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第十二章 细胞增殖及其调控
* * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * 裂殖酵母的cdc2 基因,是第一个被分离出来的cdc基因,它的表达产物是一种相对分子量为34×103的蛋白,被称为p34cdc2。进一步研究发现,p34cdc2具有蛋白激酶活性(丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶),可以使多种蛋白质底物磷酸化,因而被称为p34cdc2激酶。在G1/S转换和G2/M转换两个地方都发挥作用(即阻断细胞周期在晚G1期或G2期)。 芽殖酵母的cdc28基因是第二个被分离出来的cdc基因,它的表达产物也是一种相对分子量为34×103的蛋白,被称为p34cdc28。 它也是一种蛋白激酶,在G2/M转换过程中起中心调节作用,同时对G1/S转换也是必需的。 无论p34cdc2还是p34cdc28 ,其本身本没有激酶活性,只有与其它蛋白结合后,才表现出激酶的活性。 之后,J.Maller和P.Nurse实验室立即合作,很快证明爪蟾卵中的p32与p34cdc2是同源物。 三、周期蛋白 1983年Timothy Hunt报道,通过35S-Met标记示踪,在海胆卵中发现两种特殊蛋白质(分子量约45-60KD),其含量随细胞周期进程变化而变化,一般在细胞间期内积累,在细胞分裂期内消失,在下一个细胞周期又重复这一消长现象。 即在每一轮间期开始合成,G2/M时达到高峰,M期结束突然被水解掉,下一轮间期又重新积累合成。把这两种蛋白质命名为细胞周期蛋白(cyclin), 揭示cyclin是细胞周期调控者,是诱导细胞进入M期所必需。 进一步的实验证明,周期蛋白为诱导细胞进入M期所必需,因此可能参与了MPF的功能调节。 MPF的生化成分包括两个亚单位,即Cdc2蛋白和周期蛋白。当两者结合后,表现出蛋白激酶活性。Ccd2为催化亚基,周期蛋白为调节亚基。 CDK激酶含有两个亚基: 一个是Cdc蛋白,为催化亚单位 另一个是周期蛋白cyclins, 为调节亚单位 CDK蛋白有12种:CDK1至CDK12 周期蛋白也有多种:cyclinA、B、C、D、 E、F、G、H等 在分离的10多个cdc2相关基因所编码的蛋白质都含有两个共同特点: 1.它们都含有一段类似的氨基酸序列 2.它们都可以与周期蛋白结合,并将周期蛋白作为其调节亚基,进而表现出蛋白激酶活性,因而它们被统称为周期蛋白依赖性蛋白激酶(Cyclin-dependent kinase ),简称CDK激酶。 周期蛋白分子结构特征 调控发生在细胞周期的一些被称为检验点的关键点上,不同的点涉及不同的CDK和cyclin。各种CDK蛋白分别与不同的cyclin结合,在细胞周期的不同时期起调节作用。 CDK激酶通过磷酸化其底物对细胞周期进行调控。 不同周期蛋白的表达时期不同,与不同的CDK结合,调节不同CDK激酶的活性。 部分哺乳动物和酵母细胞周期蛋白在细胞周期中的积累及其与CDK激酶活性的关系。 周期蛋白B(cyclinB)发生周期性变化,在G1 期周期蛋白B 逐渐积累,当积累达到某个阈值时与Cdk 结合,二者形成有丝分裂促进因启子(MPF),MPF 启动细胞进入分裂期。与此同时MPF 又激活一种遍在性蛋白依赖性蛋白水解系统,引起周期蛋白B 的降解破坏,使分裂进入后期。之后B 又逐渐积累,重新进入下一个变动周期。 小 结 细胞周期 细胞分裂 MPF的组成 MPF调控机制(CDK激酶) * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * ?后期染色体分离的两个阶段: ●后期A 该阶段染色体的分离由微管去聚合假说解释:动粒微管不断解聚缩短,造成的拉力将染色体拉向两极。 机理:微管的正端插入动粒的外层, 微管在此端去组装。动粒中的ATP水解提供能量,驱动微管上的马达分子向极部移动,拉动染色体向极移动。 后期A ●后期B 该阶段染色体的分离由极(纺锤体)微管滑动假说 解释:染色体的运动由极微管的聚合所产生推力造成。 机理:极微管在+端添加微管二聚体进行聚合延长,使两极的极微管产生重叠的带;极微管产生滑动,产生将两极分开的力。 微管间的横桥能够提供机械-化学的活动。横桥上有较高的ATP酶活性,推测是一种分子马达。 纺锤体微管滑动假说 后期B 后期染色体分离 动物细胞的胞质分裂 高等植物细胞的胞质分裂 3. 减数分裂 指DNA和染色体复制一次后连续进行两 次细胞分裂,使子细胞染色体数减
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