聚合酶链式反应PCR.pptVIP

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  • 2017-02-23 发布于上海
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聚合酶链式反应PCR

聚合酶链式反应 (PCR) 一、PCR的定义: PCR(polymerase chain reaction) : 聚合酶链式反应,又称体外DNA扩增技术。 近年来发展起来的一种体外扩增特异DNA片段的技术。 DNA扩增的传统方法: 一般采用分子克隆法,需将构建的含有目的基因的载体导入细胞进行扩增,并需要用探针进行筛选,牵扯到DNA酶切、连接、转化、培养及探针杂交等技术,虽然技术上已无难点,但操作复杂,需数周到数月的时间,且不利于普及。 PCR技术:1985年由美国 Cetus 公司的Kary Mullis 首创,可以将微量目的DNA片段扩增一百万倍以上。 优点:敏感度高、特异性强、产率高、重复性好以及快速简便等,广泛应用于微生物学、考古学、法医学及体育等领域,并已普及到许多普通实验室,大大简化了传统的分子克隆技术,从而比较容易地对目的基因进行分析、鉴定。 Kary Mullis 本人因此获1993年诺贝尔化学奖。 二、PCR的原理: 用于扩增位于两段已知序列之间的DNA片段,类似于天然DNA的复制过程。 以拟扩增的DNA分子为模板,以一对分别与模板5′末端和3′末端互补的寡核苷酸片段为引物,在DNA聚合

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