第三章病毒和亚病毒.doc

第三章 病毒和亚病毒 本章重点:病毒的基本形态构造、化学组分、类群、繁殖方式；噬菌体的形态构造；类病毒的形态构造。 本章难点：病毒的生长（繁殖）方式；一步生长曲线。 建议学时：10学时 第一节 病 毒 非细胞生物：（真）病毒：至少含有核酸和蛋白质两种组分 类 类病毒：只含具单独侵染性的RNA组分 亚病毒 拟病毒：只含不具侵染性的RNA组分 朊病毒：只含蛋白质一种组分 一、概述 (一)什么是病毒？ 病毒是超显微的，无细胞结构，专性活细胞内寄生，在活细胞外具一般化学大分子特征，一旦进入宿主细胞又具有生命特征。 (二)特点 1、形体十分微小，，电镜可见；无细胞结构，分子生物，由核酸和蛋白组成，且一种病毒仅含一种类型核酸；专性活细胞内寄生，有宿主专一性，无独立代谢酶系，依赖宿主自身复制；对抗生素不敏感，对干扰素敏感 (三)种类 1、微生物病毒??? 2、植物病毒???? 3、脊椎动物病毒???? 4、昆虫病毒??? （1）核型多角体病毒（NPV）：在昆虫细胞核内形成的、具有蛋白质包涵体的杆状病毒。 （2）质型多角体病毒（CPV）：在昆虫细胞质中形成的、具有蛋白质包涵体的球状病毒。 （3）颗粒体病毒（GV）：可在细胞核或细胞质中形成、具有蛋白质包涵体的的杆状病毒。 二、形态大小 (一)大小 个体极小，能通过细菌滤器，必须通过电镜观察，测量单位为nm, 多在100nm左右。(二)形态 1、个体形态 在电子显微镜下观察到的病毒粒子一般为球状、棒杆状、蝌蚪状和线状等多种形态。 2、群体形态 (1)包涵体 包涵体是病毒感染细胞后，宿主细胞内形成的一种在光学显微镜下可见的小体。包涵体为蛋白质性质，多为圆形、卵圆形或不定形，在细胞中呈现的大小数量不一，多数位于细胞质内，少数位于细胞核内，也有的在细胞质和细胞核内都存在。 应用： a.用于病毒病的辅助诊断； b.用于生物防治。 (2)噬菌斑 1)什么是噬菌斑？ 当一个噬菌体感染一个敏感细胞后，隔不久即释放出一群子代噬菌体，在固体培养基中，它们通过琼脂层的扩散又侵染周围的宿主细胞，并引起它们的裂解，如此经过多次重复，就出现了一个由无数噬菌体粒子构成的群体—噬菌斑，它是透亮不长菌的小圆斑，每一个噬菌斑是由一个噬菌体粒子形成的。 2) 噬菌斑的应用： a. 作为噬菌体的鉴定指标； b. 用于纯种分离和计数。 3)噬菌体效价的测定 噬菌体效价表示每毫升试样中所含有的侵染性的噬菌体粒子数，也即噬菌斑形成单位(pfu)。 噬菌斑×稀释倍数 噬菌体效价= 裂解液毫升数 效价的测定方法很多，如：双层平板法单层平板法玻片快速法 双层平板法简括如下： 双层平板法主要有以几个优点：①加了底层培养基后，可使原来底面不平的玻璃皿的缺陷得到了弥补；②所形成全部噬菌体班都接近处于同一平面上，因此不仅每一噬菌班的大小接近、边缘清晰，而且不致发生上下噬菌斑的重叠现象，③因上层培养基中琼脂较稀．故形成的噬菌斑较大，更有利于计数。 (3)空斑和病斑 在覆盖一薄层琼脂的一片单层细胞上，如某一细胞感染有病毒，则增殖后的病毒粒子只能扩散至邻近细胞，最终形成与噬菌斑相似的空斑。利用病毒空斑可对有活性的动物病毒粒子进行计数。 而病斑则是单层细胞受肿瘤病毒感染后，导致细胞剧增，形成类似与菌落的病灶。 (4)枯斑 指植物叶片上的植物病毒群体。 三、病毒的结构与化学组成 (一)病毒粒子的构造与化学组成 病毒粒子即指成熟的、结构完整的单个病毒，也称病毒颗粒。 1、化学组成 　 (1)核酸 每一病毒只含单一核酸：DNA或RNA。一般生物细胞中存在的是dsDNA与ssRNA，但在病毒中却发现了ssDNA、 dsDNA、ssRNA、dsRNA。功能：遗传物质基础(2)蛋白质 蛋白质是病毒的主要组成部分，其作用是构成病毒粒子外壳，保护病毒核酸免受核酸酶及其它因子破坏决定(3)其它：包膜（类脂或脂蛋白）2、病毒粒子的构造 核心：由DNA或RNA构成 核衣壳（基本构造） 病毒粒子 衣壳：由蛋白质构成 包膜（非基本构造）：由类脂或脂蛋白构成 （二）病毒粒子的基本结构类型 1、螺旋对称型—TMV ?TMV呈直杆状，中空，核酸为ssRNA,其蛋白质衣壳由呈皮鞋状的衣壳粒一个紧挨一个一逆时针方向螺旋排列而成，而病毒RNA则位于衣壳粒内侧螺旋状沟中，以距轴中心4nm处以相等的螺距盘绕于蛋白质外壳中，每三个核苷酸与一个蛋白质亚基（衣壳粒）相结合，结构极其稳定。这种对称体制的特点就是能使核酸与蛋白质亚基的结合更为紧密，在室温下50年不丧失其浸染力。 2、二