生物化学04.核酸课件.pptVIP

一、 核酸的基本结构单位——核苷酸 （一）碱基（base） 1. 嘧啶碱 2. 嘌呤碱 （二）核苷（nucleoside） 戊糖 脱氧核糖核苷 （三）核苷酸（nucleotide） 1. 核糖核苷酸 2. 脱氧核糖核苷酸 3. 多磷酸核苷酸 4. 环化核苷酸 （一）DNA的一级结构 1. DNA双螺旋结构提出的主要依据 关于碱基成对的证据： 2. DNA双螺旋结构模型要点 3. 维持双螺旋结构稳定的因素 碱基对之间的氢键 碱基堆积力（base stacking force） 碱基的疏水相互作用 范德华引力 磷酸基团上负电荷与介质中的阳离子形成的离子键 4. DNA双螺旋的不同类型 （三） DNA的三级结构 2. 真核生物 DNA（线形双链）的三级结构 3. 真核生物的染色体 三、核糖核酸 （ribonucleic acid, RNA） (一) RNA的类型 (二)RNA的碱基组成 （三）RNA的结构 1. tRNA的结构 2. rRNA的结构 rRNA的结构 3. 特殊颜色反应 1. 分子大小： 核苷酸分子量： 脱氧核苷酸对 618D ； 核苷酸对 670D DNA和RNA皆是高分子量物质。 4. 核酸的紫外吸收 嘌呤碱、嘧啶碱存在共轭双键，所以碱基、核苷、核苷酸、核酸在240-290nm处有强烈的紫外吸收，最大吸收峰在260nm处。 （二）核酸的变性、复性与杂交 1. 变性（denaturation） 热变性 2. 复性（renaturation） 3. 杂交（hybridization） (三) 核酸的凝胶电泳 凝胶电泳兼有电荷效应和分子筛效应。 琼脂糖凝胶电泳： 聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE） Structure of DNA(146bp)wrapped around a nucleosome core. 146bpDNA以左手螺旋在组蛋白核心上缠绕1.8圈。 （1）染色质的基本结构单位是核小体（nucleosome）。 Regularly spaced nucleosomes, consisting of histone complexes bound to DNA.(a) Schematic illutration; (b) electron reveals the presence of nucleosomes as “beads on a string.” 核小体化学组成： 碱性蛋白，富含碱性氨基酸(lys, Arg)，分为H1，H2A，H2B，H3，H4五类。 非组蛋白： DNA: 组蛋白: 非组蛋白: RNA = 1: 1: 0.6: 0.1 包括各种结构蛋白、参与复制与转录的蛋白等。 组蛋白： （Histone） 核小体的结构： 核心 桥 146bp DNA H2A、H2B、H3、H4 组成的八聚体 连接DNA（linker DNA）: 20~80bp DNA H1 (左手缠绕八聚体1.8圈) nucleosome A diagram of the histone octamer and nucleosome. 组蛋白八聚体 （2）真核生物染色体组装的不同层次 核小体链进一步盘绕成染色质纤丝，由纤丝组成突环，并通过DNA结合蛋白（非组蛋白）与核骨架相连，再由突环组成玫瑰花结，进而组成螺旋圈，由螺旋圈再组装成染色单体。 A model for layers of organization in a eukaryotic chromosome. 30nm 纤丝（每圈6个核小体） 150nm 突环（平均75000bp） 300nm 玫瑰花结(6个突环) 700nm 螺旋圈(每圈30个玫瑰花结) 长度 1400nm 染色体 11nm 核小体链（每个核小体200bp） 2nm DNA 核骨架 rRNA（占~80%） tRNA （占~15%） mRNA （占~5-6%） SnRNA 核内小RNA SnoRNA 核仁小RNA vRNA 病毒RNA RNA中除A、U、C、G外，还存在几十种稀有碱基。 3.5 4.3 15.9 27.8 31.1 16.6 兔肝tRNA - - 31.3 19.1 18.6 31.1 伤瘤病毒RNA 3.1 4.6 20.1 25.1 26.6 19.4 酵母tRNA 2.2 2.4 15.9 30.3 30.3 18.3 E.coli tRNA - - 23.7 24.1 27.1 25.1 E.coli mRNA - - 21.7 21.6 31.5 25.2 E.coli rRNA 甲基化碱基 ? U C G A 碱基的相对含量（摩尔百分比）