生物技术制药第6章课件.pptVIP

第六章 植物细胞制药 第一节 概述 人们利用植物作为药物已有几千年的历史了，尤其是我国对中草药的应用。近年来，随着对植物药物的重视程度的不断提高，人们力图从植物中寻找高效、低毒和廉价的药物，以攻克许多危害人类健康的疾病，癌症、爱滋病等。 高等植物次级代谢产物丰富多样，可作为食品添加剂、香料、色素、杀虫剂、化工产品等。 已知天然化合物有三万多种，其中80％以上来自植物。很多有重要药理作用的天然化合物结构复杂，无法用化学合成的方法进行人工合成。通过植物细胞培养或组织培养可大规模制备原来无法大量得到的重要化合物。 一、基本概念 1、植物组织和细胞培养 植物组织和细胞培养是指在无菌和人工控制的营养（培养基）及环境条件（光照、温度）下，研究植物的细胞、组织和器官以及控制其生长发育的技术。 植物无菌培养包括： 幼苗及较大植株的培养（植物培养）； 从植物体各种器官的外植体增殖而形成的愈伤组织的培养（愈伤组织培养）； 能够保持较好分散性的离体细胞或较小细胞团的液体培养（悬浮培养）； 离体器官的培养（器官培养）； 未成熟或成熟的胚胎的离体培养（胚胎培养）。 2、悬浮培养 在液体培养基中，能够保持良好分散性的细胞和小的细胞聚集体的培养,组织化水平较低。 3、细胞培养 利用单个细胞进行液体或固体培养，诱导其增殖及分化。目的是为了得到单细胞无性繁殖系。 4、分生组织培养 又称生长锥培养，在人工培养基上培养茎端分生组织细胞。 5、外植体 用于植物组织（细胞）培养的器官或组织（的切段），植物的各个部位如根、茎、叶、花、果、穗、胚珠、胚乳、花药和花粉等均可作为外植体进行组织培养。 6、器官形成 是指在组织培养或悬浮培养物中芽、根或花等器官的分化与形成。或者在先形成的小根基部迅速形成愈伤组织，然后再形成芽；或者在不同部位分别形成芽和根之后，再形成锥管组织而将二者连成一个轴，最后形成小植株。 7、无性繁殖 又叫克隆，指使用母体培养物反复进行继代培养时，通过同种外植体而获得越来越多的无性繁殖后代。 8、突变体 细胞本身发生遗传变异或应用诱变处理发生的遗传变异所得的新细胞。 9、继代培养 由最初的外植体上切下的新增殖的组织，培养一代称为“第一代培养”，连续多代的培养就称为继代培养。 10、次级代谢和次级代谢产物 除了核酸、核苷、核苷酸、氨基酸、蛋白质及糖类以外，具有如下特征的成分成为次级代谢产物：有明显的分类学区域界限；其合成需在一定的条件下才能发生；缺乏明确的生理功能；是生命的多余成分。 次级代谢作用是特殊蛋白质内源化合物的合成、代谢及分解作用的综合体现。生物碱、黄酮体、萜类、有机酸、木质素等。 二、植物细胞培养的发展简史 19世纪上半叶，提出了细胞学说，20世纪初叶，德国著名植物学家依据细胞理论，首次提出了高等植物的器官和组织可以不断分割，直至单个细胞。20世纪20年代初至30年代，胚胎培养和器官培养取得了一些成果。 30年代末至40年代，植物细胞器官与营养需求之间的关系。 40年代末至50年代，确定了腺嘌呤和生长素的比例是控制芽和根形成的主要条件之一，比例高时产生芽，比例低时生成根。 60年代初，分离出植物的原生质，开发了化学成分完备的生长培养基。 60至70年代中叶，开发培养基和研究培养方法。 75-85年优化细胞生长和次级代谢产物形成的研究。 90年代红豆杉细胞培养生产抗癌新药紫杉醇。 第二节 植物细胞的形态和生理特性 一、形态 单细胞植物，藻类； 多细胞植物其细胞形态多种多样，球形、类圆形、椭圆形、角形；具有支持作用的细胞细胞壁常增厚，类圆形、纺锤形；具有输导作用的细胞管形。 细胞大小不一，基本组织细胞体积较大直径在20-100微米之间，储藏组织细胞的直径可达1毫米，最长的细胞是无节乳管长达数米至数十米。 二、结构特性 高等植物为真核生物，在光学显微镜下，细胞壁、细胞核和液泡以及细胞内一些较大的结构容易辨认，植物细胞由细胞壁和原生质体组成，原生质体包括细胞膜、细胞质、细胞核和液泡。与动物细胞相比植物细胞有三个特点，细胞壁、液泡和质体。 三、细胞后含物和生理活性物质 细胞中除含有生命物质原生质体外，还有许多非生命物质，是细胞代谢过程中的产物。一类是后含物，储藏物质或废弃物质，分布于液泡内，糖类、盐类、生物碱、苷、有机酸、挥发油等，另一类是生理活性物质，对细胞内生化代谢和生理活动起着调节作用，酶、维生素、激素和抗生素等。 1、细胞后含物 生物碱，含氮有机化合物，中药含有多种生物碱，麻黄碱，咖啡，阿托品，奎宁，黄连素。 糖苷类，某些化合物和糖经糖苷键结合而成，对疾病有很好的治疗作用。 挥发油，具有芳香气味， 薄荷油、丁香油和桉油。 有机酸，糖类代谢的中间产物，苹果酸、柠檬酸、水杨酸、酒石酸。 2、生理活性物质 对细胞内生化反应和生理活动起调节作用。 酶类：生