生物技术制药第7章课件.pptVIP

第七章 酶工程制药 第一节 概述 一、酶的特性 酶是生物催化剂，大多数酶的本质是蛋白质，有些酶是核酸。酶作为生物催化剂的，除具有一般催化剂的特性：加快反应速度、降低反应活化能、不改变反应平衡点、反应前后无数量和性质变化等。 二、酶工程简介 是酶学和工程学相互渗透、发展而形成的一门新的技术科学。从应用的目的出发研究酶、应用酶的特异催化功能，并通过工程化将相应原料转化成有用物质的技术。 第二节 酶的来源和生产 一、酶的来源 普遍存在于生物体中，可直接从生物体中分离。化学合成方法目前还不成熟。早期是以动植物为原料进行提取，由于动植物生长周期长、来源有限、受地理、气候和季节等因素的影响，不适于大规模生产，利用微生物来生产酶制品是一个更好的选择。 利用微生物来生产酶制品优点 1、微生物种类繁多，动植物体内的酶在微生物中几乎都可以找到； 2、繁殖快、生产周期短、培养简便、并可以通过控制培养条件来提高产量； 3、微生物具有较强的适应性，通过各种遗传变异手段能培育出新的高产菌株。 二、酶的生产菌 1、对菌种的要求 产酶量高，酶的性能符合使用要求，最好是胞外酶； 不是致病菌、在系统发育上与病源体无关，不产生毒素； 稳定，不易变异退化，不易感染噬菌体； 能利用廉价原料，发酵周期短，易于培养。 2、生产菌来源 菌种保藏机构、有关研究部门； 从自然界中分离筛选，土壤、深海、温泉、火山、森林都是菌种采集地，筛选包括菌样采集、菌种分离、初筛、纯化、复筛、生产性能鉴定。 3、常用产酶微生物 大肠杆菌（最常用的产酶微生物）： 一般属于胞内酶，需要经过细胞破碎才能得到。谷氨酸脱羧酶，用于测定谷氨酸含量或γ-氨基丁酸；天冬氨酸酶，催化延胡索酸加氨生成L-天冬氨酸；苄青霉素酰化酶，生成新的半合成青霉素或头孢霉素；β-半乳糖苷酶，用于分解乳糖。 枯草杆菌：α-淀粉酶、蛋白酶、葡萄糖氧化酶、碱性磷酸脂酶。 青霉菌：产黄青霉用于生产葡萄糖氧化酶、青霉素酰化酶；橘青霉用于生产脂肪酶、葡萄糖氧化酶、凝乳蛋白酶。 根霉：糖化酶、α-淀粉酶、转化酶、酸性蛋白酶、脂肪酶、纤维素酶，含有较强的11α-羟化酶，常用于甾体转化。 链霉菌：葡萄糖异构酶、青霉素酰化酶、纤维素酶、碱性蛋白酶、中性蛋白酶，含有丰富的11α-羟化酶，可用于甾体转化。 三、提高药用酶产量的措施 1、添加诱导物 2、控制阻遏物浓度 3、添加表面活性剂 4、添加产酶促进剂 1、添加诱导物 对于诱导酶的发酵生产，在发酵培养基中添加适当的诱导物，可使产酶量显著提高。乳糖诱导β-半乳糖苷酶，纤维二糖诱导纤维素酶。 诱导物可分为三种：酶的作用底物、酶的反应产物、酶的底物类似物。 2、控制阻遏物浓度 有些酶的合成受到阻遏物的阻遏作用，应设法解除阻遏作用来提高酶的产量。 3、添加表面活性剂 可分为离子型和非离子型，离子型对细胞有毒害作用，只能使用非离子型，可聚集在细胞膜上，增加细胞通透性，有利于酶的分泌，可增加酶的产量。 4、添加产酶促进剂 植酸钙镁可使霉菌蛋白酶和橘青霉磷酸二酯酶的产量提高1-20倍。 第三节 酶和细胞的固定化 使用纯酶的缺点：只能使用一次，成本高，产品分离困难；酶溶液很不稳定，容易变性和失活。 固定化酶的优点：性能稳定；可反复使用，降低了成本，易与产品分离，简化下游操作。 一、固定化酶的制备 1、定义 限制或固定于特定空间位置的酶，即经物理化学方法处理，使酶变成不易随水流失、运动受到限制，而又能发挥催化作用的酶制剂。 2、固定化酶的特点 （1）、可以多次使用，而且在多数情况下，酶的稳定性提高；（2）、反应后，酶与底物和产物易于分开，产物中无残留酶，易于纯化，产品质量高；（3）、反应条件易于控制，可实现转化反应的连续化和自动控制；（4）、酶的利用效率高，单位酶催化的底物量增加，用酶量减少；（5）、比水溶性酶更适合于多酶反应。 第四节 酶工程在医药工业中的应用 酶工程的优点是工艺简单、效率高、生产成本低、环境污染小、产品收率高、纯度好、还可制造出化学方法无法生产的产品。 一、酶在疾病预防和治疗方面的应用 1、蛋白酶 临床上使用最早、用途最广的药用酶之一。 消化剂，用于治疗消化不良和食欲不振，使用时常常与淀粉酶、脂肪酶等一起制成复合酶制剂，以增加疗效，片剂，可口服。 消炎剂，对各种炎症有很好的疗效，它能分解一些蛋白质和多肽，使炎症部位的坏死组织溶解，增加组织的通透性，抑制浮肿，促进病灶附近组织积液的排出并抑制肉芽的形成，可口服、外敷和肌肉注射。 2、α-淀粉酶 消化药。 3、脂肪酶 消化剂。 假单胞菌脂肪酶能分解血液中的低密度脂蛋白和乳糜微粒，可用于预防和治疗高血脂病。 4、右旋糖苷酶 水解右旋糖苷生产小分子产物，对龋齿有显著的预防作用，可加到牙膏和淑口水中。 5、溶菌酶 抗菌、消炎、镇痛作用，作用于