血清钾(k+)测定血清钾(+)测定k+)测定.ppt

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血清钾(K+)测定 余留海 2013.11.18 主要内容 总结上节课实验报告。 知识回顾。 血清钾的几种测定方法。 酶法测定血清K+。 知识回顾 血液组成成分。 血浆 血液 红细胞 血细胞 白细胞 血小板 1、什么叫血清? 2、血清与血浆的区别? K+的主要贮存场所。 血清钾的几种测定方法 近年来,随着科学技术的发展,检测手段不断提高,离子选择性电极在临床上的广泛应用,使离子的测定向着快速、简便、准确、特异性高的方向发展.临床上检测钾离子基本上分为比浊、火焰光度分析、离子选择性电极及酶法. 全自动电解质分析仪 PL-1000B电解质分析仪采用国际上先进的离子选择电极,其整机的钾、钠、氯、钙电解质检测灵敏度、稳定性、抗干扰能力等达到了国外同类机型的先进水平。可同时检测钾、钠、氯、PH、总钙、标准离子钙等项目。 血清钾(K+)测定 (蛋白水解酶法) 一、原理: 血清中的钾离子在蛋白水解酶的作用下,从蛋白分子的吸附下解脱出来与四苯硼锂呈浊度反应,在625波长测定标准管和样品管的吸光度值,计算钾离子的含量。 二、测定方法 1.加样: 试剂 空白管 标准管 样品管 蒸馏水(μl) 100 - - 标准液(μl) - 100 - 血清(μl) - - 100 试剂R1(ml) 2.0 2.0 2.0 充分混匀 试剂R2 (μl) 200 200 200 混匀后置37℃保温3分钟,上机测定。 2.分光光度计测定方法:波长625nm,以空白管调零,测定标准管和样品管吸光度值,按公式计算测定结果。 计算公式: 样品钾含量(mmol/L)= (A样/A标)×C标 (C标=5.0mmol/L) 3.各型半自动生化分析仪测定方法: 分析方法 波长 (nm) 温度 (℃) 延迟时间(s) 测量时间(s) 试剂空白 标准值 (mmol/L) 吸入量 (ml) 终点法 620或 630 37 2 2 否 5.0 1000 三、参考值: 正常人参考值:(3.5 ~ 5.4)mmol/L 四、临床意义: 1.血清钾增高:血清钾>5.6 mmol/L为高血钾。 ⑴肾排钾减少:如急性或慢性肾功能衰竭所致少尿或尿闭,使体内钾不能排出体外;肾上腺皮质功能减退时,肾排钾能力降低;应用保钾性利尿剂药物影响肾脏排钾。 ⑵摄入过多:食入或静脉输入大量钾盐,超过审排钾能力,尤其是肾排泄功能降低时更易发生高血钾。 ⑶细胞内钾外逸:如严重溶血、组织损伤或缺氧、代谢性酸中毒及应用胰高血糖素、β受体阻滞剂、精氨酸、琥珀胆碱、强心苷药物均可使细胞内钾转移到细胞外液而引起高血钾。 ⑷其它:醛固酮缺乏或长期应用抗醛固酮利尿剂及家族性周期性麻痹等,均可使血钾升高。 血清钾高于7mmol/L时,可引起严重的肌肉、心肌和呼吸功能的抑制性应激紊乱,以及特异的心电图改变。超过10mmol/L时,即可发生心室纤颤,心脏停搏而导致死亡。 2.血清钾降低:血清钾<3.5mmol/L为低钾血症。 ⑴钾盐摄入不足:长期低钾饮食、厌食或禁食等。 ⑵钾丢失过多:胃肠道丢失,如严重呕吐、腹泻、胃肠减压、十二指肠引流;尿液丢失,如大量应用肾上腺皮质激素、利尿剂、醛固酮增多症、碱中毒等,恶性肿瘤因细胞分解过多,大量钾从尿中排出。 ⑶分布异常:注射胰岛素或应用维生素B2可使血清钾向细胞内转移。 五、方法学评价 1. 空白吸光度 A625﹤0.080 2. 线性范围 2.5~7.5mmol/L (r﹥0.995) 3. 重复性 测量精密度(CV%)≤5.0%;批间差(R%) ≤6.0 % 4. 准确性 在质控品的范围 六、注意事项 1.应用新鲜血清,且无溶血、无乳糜。 2.先将标准液和血清加入试管底部,加R1时沿管壁按同一流速加入,充分混匀。 3.为减少定标误差,可做两个标准管将两管混合后定标。用余下的定标液可监测仪器的重复性。 小结 谢谢!

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