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生理学实验绪论 于 蕾 生理学系 Y_lei@jlu.edu.cn 生理学实验的目的 1.通过实验使学生初步掌握生理学实验的基本操作技术， 2.了解获得生理学知识的方法， 3.验证和巩固生理学的基本理论， 4.培养科学作风和分析问题解决问题的能力。 基本原理 了解生理现象的某些规律 设定实验 选取合适的动物， 改变作用于动物的某些条件 观察实验对象的某些生命活动的变化 分析实验效应 生理学实验的分类 整体水平 急性在体实验 急性实验 器官系统水平 急性离体实验 慢性实验 细胞分子水平 生理学实验的基本原则 1. 对照 2.随机 3.重复 坐骨神经-腓肠肌标本的制备 一、实验原理 1.兴奋性 2.兴奋的传布 3.兴奋收缩耦联过程 兴奋-收缩耦联—— 三个主要步骤： ①肌膜电兴奋的传导  ②三联管处的信息传递 ③肌浆网（纵管系统）中Ca2+的释放 肌膜AP沿横管膜传至三联管 ↓ 终池膜上的钙通道开放 终池内Ca2+进入肌浆 ↓ Ca2+与肌钙蛋白结合 引起肌钙蛋白的构型改变 ↓ 原肌凝蛋白发生位移 暴露出细肌丝上与横桥结合位点 ↓ 横桥与结合位点结合 激活ATP酶作用,分解ATP ↓ 横桥摆动 ↓ 牵拉细肌丝朝肌节中央滑行 ↓ 肌节缩短=肌细胞收缩 兴奋-收缩（肌丝滑行）耦联 实验目的 1.制备蟾蜍坐骨神经-腓肠肌标本 2.观察兴奋与兴奋性，刺激与收缩等基本生理现象 实验器材与药品 蛙板，玻璃板，普通剪刀，手术剪刀，眼科剪，有齿镊，小镊子，刺蛙针，滴管，表面皿，玻璃分针，锌铜弓，任氏液 实验步骤 1.破坏蛙的脑和脊髓（一定要彻底） 2.剪除躯干上部和内脏（骶髂关节前0.5cm) 3.剥皮 4.清洗器械 5.分离两腿 6.游离坐骨神经，完成坐骨神经-小腿标本 7.完成坐骨神经-腓肠肌标本 注意事项 1.操作过程中勿污染，压榨，损伤和过度牵拉神经肌肉。 2.经常给标本滴加任氏液防止其表面干燥，以保持生理活性。 思考题 1.刺激坐骨神经，肌肉发生收缩反应，生理过程是什么？ 骨骼肌的单收缩，复合收缩和强直收缩 实验目的 观察刺激强度对收缩的影响 观察刺激频率和肌肉收缩形式之间的关系，从而认识在自然状态下肌肉的收缩形式，产生机制及其生理意义 实验原理 单收缩：一个短暂的有效刺激 复合收缩：相继两个有效刺激，间隔时间小于肌肉单收缩的总时程 不完全强直收缩：串刺激，后一刺激落在前一刺激引起肌肉收缩的舒张期 完全强直收缩：串刺激，后一刺激落在前一刺激引起肌肉收缩的收缩期 实验器材和药品 BL420 电子刺激器 支架台 蛙手术器械 任氏液 实验步骤 坐骨神经腓肠肌标本制备(置于任氏液之中10-15min ) 仪器连接和标本放置 项目观察：（1）刺激强度对肌肉收缩的影响 （2）刺激频率对肌肉收缩的影响 1） 单脉冲刺激神经，观察肌肉单收缩波形的高度与宽度。 2） 双脉冲刺激神经，并缩短刺激之间的时间间隔（0.06-0.08s）,记录舒张期复合收缩曲线。进一步缩短刺激的时间间隔（0.02-0.04s），记录收缩收缩期复合收缩曲线 3）选择串脉冲, 给予神经连续刺激，记录肌肉的不完全性强直收缩曲线。进一步减少串脉冲刺激间隔，可记录到肌肉的完全性强直收缩曲线。