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2.2.2糖类、脂肪的鉴定
1.还原糖的鉴定 根据是否具有还原性,分为: 还原性糖: (单糖、麦芽糖、乳糖) 非还原性糖: (蔗糖、多糖) 可溶性还原糖与斐林试剂发生作用,可生成砖红色的Cu2O沉淀。 还原糖+斐林试剂——砖红色沉淀 斐林试剂(现配现用) 甲液:0.1g/ml的NaOH溶液, 乙液:0.05g/ml的CuSO4溶液 反应式 NaOH+CuSO4→Cu(OH)2↓ 葡萄糖+2Cu(OH)2 →葡萄酸+Cu2O↓+2H2O 砖红色沉淀 蓝色 原因:Cu(OH)2是沉淀,现配的菲林试剂中Cu(OH)2还是悬浊液,能与菲林试剂反应,配置久了沉淀就会析出而无法与菲林试剂反应,所以要现配菲林试剂。 还原糖(葡萄糖、果糖)+菲林试剂 水浴加热 砖红色 ? 2min 还原糖与菲林试剂反应过程 鉴定可溶性还原糖为什么要水浴加热? 用其它热源加热不易控制温度,很容易导致反应失败,而且斐林试剂里的蓝色氢氧化铜沉淀热稳定性较差,受热(80℃以上)很容易分解生成黑色的氧化铜沉淀和水,不能生成砖红色氧化亚铜沉淀。 苹果和梨是比较理想的实验材料。 苹果、研钵、小刀 斐林试剂A液、斐林试剂B液、二氧化硅 量筒、试管架、吸管、试管夹、试管、滴管 漏斗、纱布 火柴、酒精灯、三脚架、石棉网、烧杯 取一个洗净的苹果切下一块,去皮,然后切成小块,取一部分切成小块的苹果放在研钵中,加入少许二氧化硅(石英砂),然后研磨,将研钵中加入少量水继续研磨。 将玻璃漏斗插入试管中,在漏斗上垫一层纱布,将组织研磨液进行过滤,得到苹果的组织样液。 用量筒取两毫升组织样液,再用量筒取两毫升新配制好的斐林试剂。 取一只试管,将量好的苹果组织样液倒入试管中,然后将量好的斐林试剂倒入试管中,震荡试管使溶液混合均匀,我们可以看到此时溶液呈蓝色。 将这只试管放入盛有开水的大烧杯中,用酒精灯隔水加热。 溶液的颜色开始是蓝色,然后慢慢变成砖红色。 这个实验就证明了,苹果中含有还原性糖的存在。 溶液的颜色从蓝色变成棕色,最终变成砖红色。 苹果中含有还原性的糖。 1、为什么要选白色或近于白色的材料进行试验? 2、为什么加入组织样液与菲林试剂后溶液或显蓝色? 答:减少试验材料对试验现象的干扰,使得试验现象明显。 答:菲林试剂中的Cu(OH)2在溶液中显蓝色。 2、淀粉的鉴定 实验设计应遵循的基本原则: 1、对照性原则:即实验中设立对照组,使实验结果具有说服力。 2、单一变量原则:即控制其他因素不变而只改变其中某一变量,观察其对实验结果的影响。 3、平行重复原则:在进行实验时,有些情况的出现是有偶然性的,多重复几次实验,对得出结果进行分析,更具说服力。 3.脂肪的鉴定 脂肪可以被苏丹Ⅲ染液染成橘黄色 或被苏丹Ⅳ染液染成红色 芝麻,脂肪含量丰富,但种子颗粒太小,不利于切片制作。 玉米,脂肪含量较少,种子颗粒也较小,因此也不适合做实验材料。 花生是比较理想的实验材料 我们选用花生 光学显微镜、镊子、毛笔、吸水纸、刀片、载玻片、盖玻片、培养皿 50%的酒精、苏丹Ⅲ、清水 取一粒浸泡过的花生种子,去皮,分开两片子叶,将子叶切成薄片,然后用毛笔将这些材料放入盛有清水的培养皿中。 取一片载玻片,用纱布擦净,用毛笔取一片最薄的材料,放在载玻片中央。 用滴管在花生种子薄片上滴几滴苏丹Ⅲ染液,染色2至3分钟,用吸水纸吸去花生种子薄片周围的染液。 在薄片上滴1至2滴体积分数为50%的酒精,洗去浮色,用吸水纸洗去花生子叶周围的酒精。 在薄片上滴一滴清水,盖上盖玻片,制成临时装片。 在低倍镜下寻找花生种子薄片的最薄处,将这部分移至视野中央,换高倍镜观察。 用显微镜观察花生种子薄片。 我们可以看到细胞中一个个圆形的小颗粒,这就是脂肪颗粒。 低倍镜下观察 高倍镜下观察 显微镜下观察到橘黄色的颗粒。 花生种子细胞中含有脂肪。
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