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中華民國第48屆中小學科學展覽會 作品說明書 科　　別： 生物科高中組馬蹄金抑制癌細胞的研究馬蹄金抗氧化細胞凋亡目 錄 摘要…………………………………………………...………………………………壹、研究動機……………………………………………………...……………….貳、研究目的…………………………………………………………………….…叁、研究設備及器材……………………………………………….……………….4 肆、研究過程或實驗方法………………………………………………………-9 伍、結果………………………………………………………………………….1-13 陸、討論………………………………………....................................................14-15 柒、結論…………………………………………………………………….… 捌、參考資料……………………………………………………………………..… 摘要 本以 ferric-reducing antioxidant power (FRAP), 1,1-diphenyl-2 -picrylhydrazyl (DPPH) radical scavenging, 2,2`-azinobis-(3-ethylbenzothiazoline -6-sulfonic acid) (ABTS)（radical monocation scavenging assay）等三種來馬蹄金水物與乙醇抽出物的抗氧化。，，我們選擇乙醇抽出物研究其抑制肝癌細胞增生的影響發現馬蹄金乙醇抽出物濃度愈高，抑制癌症細胞的增生越顯著。而且，從細胞週期以及DNA斷鍊 (DNA fragmentation) 之研究，發現馬蹄金之乙醇抽出物可以誘發肝癌細胞 (HepG2) 產生細胞凋亡。研究動機 常常在路邊看到「青草茶」、「養肝茶」，這些價錢很貴的飲料，一杯動 60 元，有時候一整瓶買起來還要 200 元。即使如此，看到不少人在購買。我們也覺得很好奇，為什麼人肯花這麼多錢來買這麼貴的飲料來喝，而這種飲料真的可以養肝嗎？後來我們去問了中國醫藥大學中藥研究所的教授，他告訴我們事實上「養肝茶」是由一些中草藥所組成的其中含有一種叫做馬蹄金的台灣傳統草藥，馬蹄金，又名珍珠草。這種英文名稱為 Dichondra grass 的小草其質感柔軟，形狀略呈圓形葉。又稱過牆風、葵苔, 為旋花科多年生小草，喜陰濕環境。目前馬金在台灣被中醫師用來當作抗發炎、解熱劑、降血壓劑等[1] )。馬蹄金之內含成分包括有類黃酮素，及黃烷醇類等[2]。而馬蹄金內含這ㄧ些抗氧化物質與其抗氧化能力有關[3,4]。根據高雄長庚醫院中醫部研究發現馬蹄金可用來治療急、慢性肝炎，但能否有效抑制腫瘤，尚待進一步臨床實證。高雄長庚中醫部主任黃升騰指出研究發現，馬蹄金具有調降腫瘤細胞基因 BC1-2 的表現，引發細胞凋亡，但對於一些正常細胞並未有任何明顯毒性[5]。我們之前在上生物時有聽過細胞凋亡] )，我們很想知道到底馬蹄金探討馬蹄金水抽出物以及乙醇抽出物對於肝癌細胞株 (HepG2) 存活率的影響。 研究目的 探討馬蹄金水抽出物以及乙醇抽出物在體外抗氧化的能力之比較。 探討馬蹄金水抽出物以及乙醇抽出物在體外抗氧化的能力是否與其內含之類黃酮素 (flavnoids) 以及黃烷醇類 (flavnols) 有關。探討馬蹄金水抽出物以及乙醇抽出物對於肝癌細胞株 (HepG2) 存活率的影響。 探討馬蹄金乙醇抽出物是否會引發肝癌細胞株 (HepG2) 的凋亡？ 研究設備及器材 一、實驗藥品 ’s Modified Eagle Medium)，propidium iodide (PI)。DAPI （4,6-diamidino-2-phenylindole）。 (二)、 Ribonuclease-A (RNase A)，penicillin–streptomycin，胎牛血清 (fetal bovine serum：FBS)。 (三)、 Potassium phosphates，dimethyl sulfoxide (DMSO)。 (四)、 所有實驗過程中所使用的水都是經過 Millipore 公司之 Milli-Q water purification system （Bedford, MA, USA）實驗器材 酵素免疫判讀機 (ELISA reader)、流式細胞儀 (flow cytometry)、高速離心機、攪拌機、攪伴子、紫外光分光儀 (分光光度計)、恆溫槽、恆溫培養箱、燒杯、試管、培養皿、研缽、滴管、微量吸管(micropipete)、微量吸