生物化学第三章2课件.pptVIP

竞争性抑制作用 非竞争性抑制作用 反竞争性抑制作用 竞争性非竞争性抑制作用机理示意图 酶的别构（变构）效应 酶的别构（变构）效应示意图 别构酶的动力学曲线 ATCase（天冬氨酸转氨甲酰酶）的结构及其催化链的别构过度作用 别构酶的序变模型 别构酶的齐变模型 酶的多种分子形式——同工酶 乳酸脱氢酶同工酶形成示意图 不同组织中LDH同工酶的电泳图谱 酶的定量并非对其蛋白质进行定量，而是对它的催化能力进行定量。 如何测定酶活力？ 以产物浓度对反应时间作图，可得到酶促反应速度曲线 0 产物浓度 时间 可见，反应速度只在最初一段时间内保持恒定，随着时间的延长，反应速度逐渐下降 产物浓度 时间 0 原 因 底物浓度的降低、产物的增加造成的逆反应的加快 产物的抑制作用 酶本身逐渐失活 酶活力的测定 (1)测一定时间内产物生成量 (2)测定完成一定量反应所需时间 测定时确定三种量：①加入一定量的酶；②一定时间间隔；③物质的增减量。 常用的酶活力单位有三种： A. 国际单位 (IU)? 这种单位是由国际酶学委员会规定的。 在标准条件(25℃、最适pH、最适底物浓度)下，酶每分钟催化 1 mmol 底物转化，这样的速度所代表的酶的活力即酶的量定义为1个国际单位 (IU)。 2. 酶活力与单位 B. Katal 是由国际酶学委员会于1972年规定的一种新单位 在最适条件下，每秒钟催化1 mol 底物转化所需要的酶的量定义为 1个Kat 。 1 Kat = 60×106 IU C. 自定义的活力单位 这种单位简单方便，省去了许多计算；但只能进行酶活力的相对比较。 习惯上或测定时使用的反应速度的单位定义为酶的活力单位。 有的甚至直接用测得的物理量，如单位时间内消光值的变化 (DA/t) 表示酶活力单位。 指每毫克酶蛋白所含的酶活力单位数 比活力是酶制剂纯度的常用指标 —— 比活力越大，表示酶越纯 比活力 ＝ 酶活力单位数（U） 酶蛋白质量（mg） 3. 酶的比活力 * * 可逆抑制作用可分为三种类型： 1. 竞争性抑制作用 2. 非竞争性抑制作用 3. 反竞争性抑制作用 ? 酶与抑制剂非共价地可逆结合，当用透析或超滤等方法除去抑制剂后酶的活性可以恢复，这种抑制作用叫可逆抑制作用。 二、可逆抑制作用 某些抑制剂的化学结构与底物相似，与底物竞争酶的活性中心并与之结合，从而减少了酶与底物的结合，因而降低酶反应速度。这种作用称为竞争性抑制作用。 1. 竞争性抑制作用  + I EI ES P+ E E+S 实例：磺胺药物的药用机理 H2N- -SO2NH2 对氨基苯磺酰胺 H2N- -COOH 对氨基苯甲酸 对氨基苯甲酸 谷氨酸 蝶呤 叶酸 Linewevery-Burk图 米氏方程 Lineweaver-Burk plot of competitive inhibition 某些抑制剂结合在酶活性中心以外的部位，因而与底物和酶的结合无竞争，即底物与酶结合后还能与抑制剂结合，同样抑制剂与酶结合后还能与底物结合。但酶分子上有了抑制剂后其催化功能基团的性质发生改变，从而降低了酶活性。这种作用称为非竞争性抑制作用。 2. 非竞争性抑制作用 非竞争性抑制剂，例如： 金属络合剂，如EDTA、F -、CN -、N3- 等，可以络合金属酶中的金属离子，从而抑制酶的活性。 + I EI+S ESI ES P+ E E+S + I Linewevery-Burk图 米氏方程 非竞争性抑制剂对酶促反应速度的影响 Lineweaver-Burk plot of noncompetitive inhibition 3. 反竞争性抑制作用 某些抑制剂不能与游离的酶结合，而只能在酶与底物结合成复合物后再与酶结合。当酶分子上有了抑制剂后其催化功能被削弱。这种作用称为反竞争性抑制作用(uncompetitive inhibition)。 ESI ES P+ E E+S + I 竞争性抑制作用 非竞争性抑制作用 底物与酶专一性结合 第五节 酶活性调节 一、 别构酶及酶的别构（变构）效应 二、 酶的多种分子形式 ? 同工酶（isoenzyme） 概念：有些酶分子表面除了具有活性中心外，还存在被称为调节位点（或变构位点）的调节物特异结合位点，调节物结合到调节位点上引起酶的构象发生变化，导致酶的活性提高或下降，这种现象称为别构效应（allosteric effect）,具有上述特点的酶称别构酶（allosteric enzyme）。 变构酶的特点： 变构酶分子上除了活性中心外，还有调节中心。