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4.2 分子生物学技术
基础达标
知识点一 PCR的原理
1.下列有关PCR的描述,不正确的是( )
A.是一种酶促反应
B.引物决定了扩增的特异性
C.PCR反应中的目的片段一般以2n指数扩增
D.扩增对象是氨基酸序列
2.DNA扩增过程中,DNA片段经若干次扩增,与其数目的理论值变化相符的图是 ( )
3.DNA的复制需要引物,其主要原因是( )
A.可加快DNA的复制速度
B.引物可与DNA母链通过碱基互补配对结合
C.引物的5′端有助于DNA聚合酶延伸DNA链
D.DNA聚合酶只能从3′端延伸DNA链
4.如图为DNA变性和复性示意图,下列相关说法正确的是( )
A.向右的过程为加热(80~100 ℃)变性的过程
B.向左的过程是DNA双链迅速致冷退火
C.变性与在生物体内解旋过程的条件、实质都相同
D.图中DNA片段共有4个游离的磷酸基团、4个3′端
知识点二 PCR的反应过程和操作提示
5.PCR技术扩增DNA,需要的条件是( )
①目的基因 ②引物 ③四种脱氧核苷酸 ④DNA聚合酶等 ⑤mRNA ⑥核糖体
A.①②③④ B.②③④⑤
C.①③④⑤ D.①②③⑥
6.用15N标记的一个DNA分子放在含14N培养基中复制三次,含15N的DNA分子占全部DNA分子的比例和含15N的DNA单链占全部DNA单链的比例依次是( )
A.1/4,1/6 B.1/4,1/8
C.1/2,1/8 D.1/2,1/4
7.下图所示为PCR扩增的产物,请分析此产物是哪次循环的产物( )
A.第一次循环 B.第二次循环
C.第三次循环 D.第四次循环
8.PCR操作过程中,对于温度的控制,应当控制在( )
A.37 ℃
B.室温
C.80 ℃
D.先为94 ℃,然后降至40~60 ℃,最后调至72 ℃
能力提升
9.有关PCR技术,下列叙述不正确的是( )
A.多聚酶链式反应,是一种体外迅速扩增DNA片段的技术
B.在用PCR技术扩增DNA时,DNA的复制过程与细胞内DNA的复制类似
C.PCR反应只需在一定的缓冲溶液中提供DNA模板以及四种脱氧核苷酸
D.PCR一般经历三十多次循环,每次循环分为变性、退火、延伸
10.关于PCR技术的应用,错误的一项是( )
A.古生物学、刑侦破案、DNA序列测定
B.诊断遗传病、基因克隆、古生物学
C.DNA序列测定、基因克隆、刑侦破案
D.诊断遗传病、合成核苷酸、DNA序列测定
11.PCR利用了DNA的热变性原理,PCR仪实际上也是一种能自动调控温度的仪器。下列对PCR过程中“温度的控制”的说法,错误的是( )
A.PCR反应需要高温,是为了确保模板是单链
B.延伸的温度必须大于退火温度,而小于变性温度
C.要用耐高温的DNA聚合酶
D.需要耐高温的解旋酶
12.在PCR扩增DNA的实验中,预计一个DNA分子经过30次循环后,应该得到230个DNA分子,但是结果只有约210个DNA分子,那么出现该现象的原因不可能是( )
A.Taq DNA聚合酶的活力不够,或活性受到抑制
B.系统设计欠妥
C.循环次数不够
D.引物不能与亲链结合
13.PCR一般要经过三十多次循环,从第二轮循环开始,上一次循环的产物也作为模板参与反应,由引物Ⅰ延伸而成的DNA单链做模板时将( )
A.仍与引物Ⅰ结合进行DNA子链的延伸
B.无需与引物结合,在酶的作用下从头合成子链
C.同时与引物Ⅰ和引物Ⅱ结合进行子链延伸
D.与引物Ⅱ结合进行DNA子链的延伸
14.PCR技术有效地解决了因为样品中DNA含量太低而难以对样品进行研究的问题,而被广泛应用,此过程需要一种Taq DNA聚合酶。
请回答有关问题:
(1)体内DNA复制过程中用解旋酶打开双链DNA,而PCR技术中应用________________________________________________________________________。
(2)Taq DNA聚合酶是从水生耐热细菌Taq中分离的。
①为什么Taq细菌能从热泉中被筛选出来呢?
________________________________________________________________________。
②Taq DNA聚合酶的功能是________________________________________________。
③Taq DNA聚合酶的化学本质为蛋白质,可用________法和__________法进行分离。
(3)相对于细菌分离,DNA分子的分离和提取操作要复杂的多。
①在DNA提取中两次用到蒸馏水,其目的分别是:__________________________
____________
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