04章核苷酸和核酸4课稿.ppt

Pyrosequencing (焦磷酸测序, Biotage ) 454 Sequencing — a brand of sequencing by 454 Life Sciences, that dramatically expands pyrosequencing Sequencing by hybridization Nanopore sequencing Polony sequencing (聚合酶克隆 ) 大多数细胞内DNA处于欠旋状态 闭环DNA（closed-circular DNA ）分子接近B型结构时（10.5bp/圈）为松弛状态。 生物学来源的闭环DNA通常为非松弛状态。 细胞调节的张力诱导DNA超螺旋 闭环DNA通常处于欠旋状态 第十二节核酸的分离纯化和鉴定 一、核酸的分离、提取通则 防止核酸的降解和变性 : 防止过酸、过碱对磷酸二酯键的破坏（一般在 pH 4-10下进行） ; 避免剧烈搅拌； 防止核酸酶（DNase , RNase ）的作用。 抑制DNase： 可加柠檬酸钠、EDTA等金属螯合剂；或加去污剂十二烷基硫酸钠（SDS）；或加蛋白变性剂。 抑制RNase： 实验器皿高温，或高压灭菌，不能高压灭菌的用 具用0.1%二乙基焦碳酸盐（diethyl pyrocarbonate, D